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【原创】一般用狭缝几做荧光呢?

分子荧光光谱

  • 狭缝的大小对荧光的强度很重要,大家用多大做呢?
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  • zlgong09

    第1楼2009/06/12

    狭缝大小可根据你所测物质的荧光大小适当的调整。在一浓度在,如荧光过大,超过量程,可调整狭缝来调整荧光强度

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  • 夕阳

    第2楼2009/06/12

    应助达人

    不能仅凭狭缝的大小来改变荧光强度,还要考虑分辨率的问题。
    对于激发侧而言,狭缝加大有时荧光强度反而减少。
    对于荧光侧而言,狭缝加大可以使荧光强度提高同时重现性得到提高,但是分辨率随之降低。

    pfz1985 发表:狭缝的大小对荧光的强度很重要,大家用多大做呢?

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  • auto1235

    第3楼2009/06/12

    不能仅凭狭缝的大小来改变荧光强度,还要考虑分辨率的问题。
    对于激发侧而言,狭缝加大有时荧光强度反而减少。
    ----仪器的PMT电压会和激发狭缝大小成反比关系,
    ----你可以自己设计衰减片来手动达到目的。

    对于荧光侧而言,狭缝加大可以使荧光强度提高同时重现性得到提高,但是分辨率随之降低。
    ----实际是荧光峰的带宽发生了变化,和紫外可见光度计一样。

    ----仪器一般还可以手动调节PMT高压的档位或手动设置衰减。

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  • pfz1985

    第4楼2009/06/13

    很好!谢谢

    anping 发表:不能仅凭狭缝的大小来改变荧光强度,还要考虑分辨率的问题。
    对于激发侧而言,狭缝加大有时荧光强度反而减少。
    对于荧光侧而言,狭缝加大可以使荧光强度提高同时重现性得到提高,但是分辨率随之降低。

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  • maqin909

    第6楼2009/06/30

    狭缝的宽度对荧光粉的发光强度是很重要的!
    我们实验室有的时候多采用3 nm的!

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  • shanshunan

    第7楼2009/11/21

    针对这句话“仪器的PMT电压会和激发狭缝大小成反比关系”,我有个疑问,我们实验室用的是瓦里安的cary eclipse荧光光度仪,PMT电压和激发狭缝都可以单独调节,貌似没有什么关系。

    auto1235(auto1235) 发表:不能仅凭狭缝的大小来改变荧光强度,还要考虑分辨率的问题。
    对于激发侧而言,狭缝加大有时荧光强度反而减少。
    ----仪器的PMT电压会和激发狭缝大小成反比关系,
    ----你可以自己设计衰减片来手动达到目的。

    对于荧光侧而言,狭缝加大可以使荧光强度提高同时重现性得到提高,但是分辨率随之降低。
    ----实际是荧光峰的带宽发生了变化,和紫外可见光度计一样。

    ----仪器一般还可以手动调节PMT高压的档位或手动设置衰减。

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  • lxz0502

    第8楼2009/12/04

    请问怎么调节PMT的电压?

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  • slenna

    第9楼2010/10/20

    pmt电压,不是有选择项的吗???例如 400 700 250 等等

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  • 夕阳

    第10楼2010/10/22

    应助达人

    在荧光分光光度计中:光电倍增管的工作电压与仪器的狭缝确实是成反比关系。但是有个前提,就是“当荧光值保持不变时”。
    这个关系从实验中很容易判断出来;无论改变那一侧的狭缝,当负高压不变时,荧光值均会下降,要想回到原值,则必须提高复高压。反之则反。
    其实,狭缝与光电倍增管负高压的反比关系,不仅仅存在荧光仪上,在紫外可见分光广度计,原子吸收或红外光谱仪上也是一样的,只不过届时的负高压是 自动调整的,使用者不会太关注罢了。

    shanshunan(shanshunan) 发表:针对这句话“仪器的PMT电压会和激发狭缝大小成反比关系”,我有个疑问,我们实验室用的是瓦里安的cary eclipse荧光光度仪,PMT电压和激发狭缝都可以单独调节,貌似没有什么关系。

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