【求助】硝基呋喃检测的几个问题

你原来的方法呢，你是参考的国家标准么，完整的方法写出来吧，一般就是称10g的，在足够纯度高的情况下，后面几个我就没法回答了。

1.分别称取14.9和13.2克，因为标准品是SEM.HCL和AHD.HCL 而不是SEM和AHD
2.磷酸氢二钾是为了调节pH值 在接近中性的条件下待测物以分子形式存在，通过液液萃取将其转移至有机相中。也可以用氢氧化钠，具体根据你做的样品。只要是pH在所需范围内即可。一般是根据标准上的配成1MMOL
3.最好是现配现用，原因未知

第一个问题，看你出报告的时候以哪种物质计，以哪种计那你配的时候就换算成哪种物质应该取的量。一般要扣除不纯度；第二个问题，磷酸氢二钾溶液具有缓冲PH的作用，我提倡用浓度为0.1mol/L的，加10mL,调PH值肯定要用NaOH的。我见过的很多方法，基本都是样品里加0.1mol/L盐酸溶液，加衍生溶液，有的方法还要加内标。然后过夜反应。因为之前加了盐酸，所以过夜后，要先加一定量的氢氧化钠溶液中和盐酸，然后加0.1mol/L磷酸氢二钾缓冲PH.第三个问题，2-硝基苯甲醛不用现用现配的，一般保存条件合适（放在0-4度保存于棕色专用瓶中），用一个月不成问题。当然，如果不放心，可以在自己的实验过程中验证有效期。

第一个问题，看你出报告的时候以哪种物质计，以哪种计那你配的时候就换算成哪种物质应该取的量。一般要扣除不纯度；第二个问题，磷酸氢二钾溶液具有缓冲PH的作用，我提倡用浓度为0.1mol/L的，加10mL,调PH值肯定要用NaOH的。我见过的很多方法，基本都是样品里加0.1mol/L盐酸溶液，加衍生溶液，有的方法还要加内标。然后过夜反应。因为之前加了盐酸，所以过夜后，要先加一定量的氢氧化钠溶液中和盐酸，然后加0.1mol/L磷酸氢二钾缓冲PH.第三个问题，2-硝基苯甲醛不用现用现配的，一般保存条件合适（放在0-4度保存于棕色专用瓶中），用一个月不成问题。当然，如果不放心，可以在自己的实验过程中验证有效期。[/quote]

还有问题想请教一下：衍生的时间一定要16h吗，多点少点有没关系啊？另外，需要一直振荡吗？

衍生时间长点短点应该问题不大，我试过偏差2h最终结果是正常的。少太多就怕衍生不够。
最好要一直振荡，振荡的目的也就是使其衍生化完全。如果没有条件振荡，可加长衍生化时间。

还有问题想请教一下：衍生的时间一定要16h吗，多点少点有没关系啊？另外，需要一直振荡吗？

[/quote]以前做的时候，一般要少于16h，大约14h左右。想要当天完成实验那是不可能的，只能过夜反应，这样可以把时间安排得很合理。过了夜，时间就差不多了，时间太少不行。至于震荡，我们做的时候没有那种要求，主要是过夜衍生前震荡混匀。有条件震荡更好，没有条件的话，个人觉得不震荡影响不太大。有机会可以做个对比实验。

在衍生前是必须振荡的。
我有做过衍生化时放置在恒温振荡摇床（有振荡）和放置在恒温培养箱（无振荡）最终的结果并没有什么差异。

恒温培养箱也可以啊，那就不一定要用水浴咯？
我没有内标，只有四个代谢物标准，对结果影响大吗？

我也没有用水浴，有听说水浴的效果比较好，应该是温度会比较均匀。我是用气浴。
如果方法做熟练了，没用内标应该影响也不大的。但还是建议要用内标的吧，我也就用两种内标：AOZ-D4、SCA-13C15N2，另外两种也没用内标。购买一次内标可以用好几年的。