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【分享】HPLC运行中及停机前的注意事项

zsq326

2009/08/12

液相色谱（LC）

一、仪器运行中的注意事项：

1、分析过程中要注意观察泵压的异常变化，当泵压急剧升高或无泵压时，应停止工作，查寻原因。泵压波动往往和泵室内有气泡有关，应排除之。另外还应该注意基线噪音的变化，噪音水平增加，常与色谱柱受污染或柱固定相流失有关，应注意及时查寻和排除。

2、分析中要注意柱效的变化情况，当发现色谱柱受到比较严重的污染时，应停止进样，可以用溶剂清洗，待柱效恢复正常后再进行分析工作。同时应该检查流动相、样品（或标准）溶液，查寻原因。

3、分析过程中要注意流动相的补充，避免贮液瓶中流动相被排空。在更换流动相种类时应注意溶剂互溶问题，防止发生盐析现象。

4、进行低压梯度洗脱时，要注意脱气，可以采用氮气来排除流动相中的溶解氧，以防空气进入流动相。

5、仪器在运行中遇到突然停电时，要及时关闭总电源，以防再次来电时对仪器造成冲击。

二、仪器停机前的注意事项：

1、在完成全部分析并取得所有的分析数据后，不应立即停泵关机，需要对色谱分离系统进行冲洗（一般半个小时），以除去色谱柱内的杂质。可以选择与样品亲合的溶剂，将样品中保留效果极强的成份从色谱柱内洗脱出来。在使用离子交换色谱柱进行分析时，还应参考样品中离子的性质和离子强度，可以参照柱再生的方法进行冲洗。

2、关机时要注意顺序，先关闭加温部分，待降温后才能停泵。

3、选择一种适合的固定溶剂做为色谱流路系统的保存溶剂。特别是在流动相种类很多时，更应予以注意。一般C18柱可以选用甲醇（100%浓度）做为保存溶剂。注意严禁水或缓冲溶液长时间在色谱流路中停留。另外也应注意更换的溶剂之间要互溶。

4、当色谱柱需要从仪器上取下时，不锈钢柱应在柱内填料充满溶剂下进行保存。

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yangshaobo

第1楼2009/08/13

不错
谢谢
收藏
呵呵

0

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