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【分享】HPLC运行中及停机前的注意事项
zsq326
2009/08/12
私聊
液相色谱(LC)
一、仪器运行中的注意事项:
1、 分析过程中要注意观察泵压的异常变化,当泵压急剧升高或无泵压时,应停止工作,查寻原因。泵压波动往往和泵室内有气泡有关,应排除之。另外还应该注意基线噪音的变化,噪音水平增加,常与色谱柱受污染或柱固定相流失有关,应注意及时查寻和排除。
2、 分析中要注意柱效的变化情况,当发现色谱柱受到比较严重的污染时,应停止进样,可以用溶剂清洗,待柱效恢复正常后再进行分析工作。同时应该检查流动相、样品(或标准)溶液,查寻原因。
3、 分析过程中要注意流动相的补充,避免贮液瓶中流动相被排空。在更换流动相种类时应注意溶剂互溶问题,防止发生盐析现象。
4、 进行低压梯度洗脱时,要注意脱气,可以采用氮气来排除流动相中的溶解氧,以防空气进入流动相。
5、 仪器在运行中遇到突然停电时,要及时关闭总电源,以防再次来电时对仪器造成冲击。
二、仪器停机前的注意事项:
1、 在完成全部分析并取得所有的分析数据后,不应立即停泵关机,需要对色谱分离系统进行冲洗(一般半个小时),以除去色谱柱内的杂质。可以选择与样品亲合的溶剂,将样品中保留效果极强的成份从色谱柱内洗脱出来。在使用离子交换色谱柱进行分析时,还应参考样品中离子的性质和离子强度,可以参照柱再生的方法进行冲洗。
2、 关机时要注意顺序,先关闭加温部分,待降温后才能停泵。
3、 选择一种适合的固定溶剂做为色谱流路系统的保存溶剂。特别是在流动相种类很多时,更应予以注意。一般C18柱可以选用甲醇(100%浓度)做为保存溶剂。注意严禁水或缓冲溶液长时间在色谱流路中停留。另外也应注意更换的溶剂之间要互溶。
4、 当色谱柱需要从仪器上取下时,不锈钢柱应在柱内填料充满溶剂下进行保存。
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yangshaobo
第1楼
2009/08/13
不错
谢谢
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