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【求助】各位来帮帮小弟,色谱柱清洗的问题!

液相色谱(LC)

  • 我每次做完陈皮的含量测定后,第二日再去做其他测定时,峰都会出现严重的拖尾,一般我做完后都是用甲醇清洗柱子,大家有什么好的方法吗?我用的C18反相柱!谢谢先
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  • 柏坡

    第1楼2009/08/29

    还是没洗好,您用的是什么流动相?如果甲醇洗不好建议您用极性更强点的溶剂清洗。

    色谱柱也可以反冲,也有些与样品有关。

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  • yangshaobo

    第3楼2009/08/30

    平衡基线的情况怎么样啊?最后用甲醇冲柱子的时间怎么控制?

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  • lcw0227

    第4楼2009/08/30

    平衡基线很正常,最后用甲醇冲时,都是冲到基线平稳!

    yangshaobo 发表:平衡基线的情况怎么样啊?最后用甲醇冲柱子的时间怎么控制?

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  • 小卢

    第5楼2009/08/30

    很正常啊,我做西药的时候都有此情况,何况是中药,杂质更多了。
    建议:
    第一步,进完样后,再空走流动相1小时,冲洗一下供试品在柱内的残留。
    第二步,换甲醇:水=10:90比例,0.5ml每min,冲洗色谱柱2小时。
    第三步,换100%甲醇,0.5ml每min,冲洗色谱柱2小时。
    如果第二天没有做实验,建议24小时后再按二、三步冲洗一下。尤其是流动相中有盐时,更应该严格按二、三步骤进行。

    lcw0227 发表:平衡基线很正常,最后用甲醇冲时,都是冲到基线平稳!

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  • lcw0227

    第6楼2009/08/31


    楼上的方法试过了,但是峰还是这样子的,究竟是什么原因?上图是我做的峰的截图!

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  • weiweijunling

    第8楼2009/09/06

    应助达人

    不同的实验项目最好用不同的色谱柱,不要混用,最好固定下来,这样对柱子比较好,以防不同的样品,流动相发生发现,生成的杂质吸附在柱子上,或是根柱子的固定相发生反应。当然啦,时常的维护也是很重要的,比如,做完样后先用5%甲醇水溶液冲洗30min,再用甲醇冲洗30min.

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