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【讨论】内径不同,其他规格相同的色谱柱,载气由氦气换为氮气,做方法转移需要调节哪些参数?

气相色谱(GC)

  • 某原料药,欧洲药典要求用30m*0.25mm,膜厚为0.25um的HP-1色谱柱,分流比为100:1,流速1ml/min,载气为He氦气,主峰大约13min出峰,FID
    但是手里只有30m*0.32mm,膜厚为0.25um的HP-1色谱柱,也就是与方法相比,只是内径不一样。而且由于氦气太贵,国内一般都是用氮气做载气。
    按照欧洲药典方法,只不过色谱柱换成大口径的,载气换为氮气,保留时间大概是9min左右。那么是否要相应的把流速做下调整?或者调解分流比?
    要向请教各位的是,从成本节约方面考虑,在杂质等可以分离的情况下,是否可以用0.32mm口径GC柱,而不用0.25mm的?因为毕竟后者好像是原来做GC-MS的吧?
    另外,是否可以用氮气做载气而不用氦气?
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  • symmacros

    第1楼2009/09/19

    应助达人

    0.32mm比0.25mm柱子分离效率略差一点,用氮气一般会比氦气略差一点,但只要能够达到分离要求(主峰及杂质能良好分离)就行。如果调整流速能是分离及峰型更好,那就不妨调一下。氢气的分离效果会比氮气好一些,如果样品里的组分不与氢气发生作用,也可以用氢气做载气,但要注意安全。

    yeballo 发表:某原料药,欧洲药典要求用30m*0.25mm,膜厚为0.25um的HP-1色谱柱,分流比为100:1,流速1ml/min,载气为He氦气,主峰大约13min出峰,FID
    但是手里只有30m*0.32mm,膜厚为0.25um的HP-1色谱柱,也就是与方法相比,只是内径不一样。而且由于氦气太贵,国内一般都是用氮气做载气。
    按照欧洲药典方法,只不过色谱柱换成大口径的,载气换为氮气,保留时间大概是9min左右。那么是否要相应的把流速做下调整?或者调解分流比?
    要向请教各位的是,从成本节约方面考虑,在杂质等可以分离的情况下,是否可以用0.32mm口径GC柱,而不用0.25mm的?因为毕竟后者好像是原来做GC-MS的吧?
    另外,是否可以用氮气做载气而不用氦气?

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  • xqianghuang

    第2楼2009/09/22

    GC-MS的钱都花了,还省这点气钱,如果换成你要改的条件,效果就查很多了。

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  • yeballo

    第3楼2009/09/23

    不过俺用的是GC-FID 不是GC-MS 0.25的柱子貌似是MS常用的吧

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  • 小儿科

    第4楼2009/09/23

    H2 He分离度好,出峰要快一些。N2分离差一些,出峰慢一些。

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  • yeballo

    第5楼2009/09/23

    EP上推荐的30m*0.25mm 0.25um柱子,载气为氦气,分流比100的参考保留时间是13min,我用HP-1 30m*0.32mm 0.25um柱子,载气为氮气 保留时间为9min,AT-1 30m*0.32mm 0.25um柱子,载气为氮气 保留时间为10min,有点糊涂了

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  • xqianghuang

    第6楼2009/09/29

    没个厂家的色谱柱都不同,如果厂家不好,不同批次都差很大

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  • 皮皮鱼

    第7楼2009/09/30

    1、两个柱子相比不同,即使同样的线速度,出峰时间必然存在差异。
    2、不同口径但相同柱长,同样的柱前压下,线速度不同,出峰时间也必然存在差异。
    3、不同气体粘度不同,同样的柱前压下,线速度不同,出峰时间也必然存在差异。

    在你这个例子中,前两个情况都会造成出峰时间提前,后一个会造成出峰时间拖后。当然总体影响你已经用实际分析测定出来了,不需要迷糊吧。

    要点:分析好不好,主要看分离情况和检测情况,如果不是很关心分析强度的话,出峰时间无所谓吧。分离效果良好才是关键,何必在乎是否和欧典的时间相同与否呢?所以前面分析虽然可以解惑,但没实际价值。。。。。。根据分离情况调整柱前压和流速吧,分开了就好。方法参数不是必然的,仅仅是参考值。

    yeballo 发表:EP上推荐的30m*0.25mm 0.25um柱子,载气位氦气,分流比100的参考保留时间是13min,我用HP-1 30m*0.32mm 0.25um柱子,载气位氮气 保留时间为9min,AT-1 30m*0.32mm 0.25um柱子,载气位氮气 保留时间为10min,有点糊涂了

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