【求助】弱弱的问下，为什么反相色谱的流动相必须加水？

应助达人

可以都用有机相，但你的样品极性不够弱的话，所有的峰都集中在2min处出峰，分不开，还跟溶剂峰合在一处，这样还能分析吗？

不是必须加水，是大多数情况下需要水，或水溶液。

有的不用水，有的只用水溶液，如纯缓冲体系

你的意思是说样品没保留，全都在流动相中了吧？假如样品也有所保留呢？你能具体说下，水的作用么？

我刚刚在一本资料上发现了这个问题的答案，原来存在一种非水反相HPLC，主要用于强疏水性样品的分离，如脂类、合成聚合物，其中流动相通常为高极性（A）和低极性（B）有机溶剂的混合，一般来说，A溶剂为ACN或MeOH，B溶剂为THF、氯仿、二氯甲烷、丙酮

不一定要用水，流动相极性大于固定相极性的情况下才用反相色谱，所以在保证流动相极性大于固定相极性的情况下就可以进行实验了。但是这个基本前提你保证不了的话就要用水提高流动相极性。

学习了。

感觉添加水是为了调节流动相得极性，从而得到适合洗脱能力。

好像跟粘度有关吧 ，专家来解释下

应助达人

流动相加水就是用于调节流动相的极性，进而影响溶质的容量因子，达到分离样品的目的，维生素E你用纯甲醇做流动相也要比较长时间才出峰，我用过98%的甲醇，20分钟后才出峰（具体多少忘了）