仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
当前位置： 仪器社区 >生命科学仪器 > PCR > 帖子详情

【讨论】土壤DNA提取及细菌16S rDNA PCR扩增问题，寻求大家帮助！急！

  • chengjianzhong
    2009/10/19
    • 私聊

PCR

  • 我用MO Bio的soil DNA Isolation Kit提取土壤总DNA，提取的DNA直接跑胶，看不见任何条带，采用细菌16S rDNA通用引物（27F和1492R)进行PCR扩增，也没有结果，有一次我将试剂盒提取的DNA50倍稀释后，进行细菌16S rDNA的PCR扩增，扩增出了目的条带，我所用的酶为Takara的LA Taq，用普通的Taq酶扩增不出来，但隔了一周后再去重复，什么条件都一样，却再也扩不出来了，我重新提取了新的DNA进行PCR,依然没有结果，不知道是什么原因，请大家帮忙分析一下，希望有做过土壤微生物多样性的高手提供点提取土壤DNA以及扩增细菌16S rDNA的实验方法，我将不胜感激！我现在非常着急！希望能尽快得到大家的帮助！
相关话题
    +关注 私聊

  • swingdog

    第1楼2010/03/24

    土壤里面腐殖酸含量比较高，纯化过程也很难完全去除掉，这个对PCR会有抑制，所以稀释后腐殖酸浓度也降低了，就能P出来；但跑胶没有条带但稀释后却能P出来还是挺奇怪的～
    PCR的成功率本来就不是100%，影响因素很多，有的时候是完全想不到的因素导致的P不出来，还是要多做，摸索出最优条件才能提高点成功率，不过P不出来的时候还是挺痛苦的～

0
近期热榜
热门活动
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐

品牌合作伙伴

丹纳赫苏州基地 打工人的梦想

岛津
岛津
日立科学仪器
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
日本电子株式会社
丹纳赫
丹纳赫
安捷伦
安捷伦
赛默飞世尔科技
赛默飞世尔科技
普析通用
普析通用
欧波同
欧波同
天美
天美
天瑞仪器
天瑞仪器
德国耶拿
德国耶拿
海能技术
海能技术
马尔文帕纳科
马尔文帕纳科
磐诺科技
磐诺科技
上海仪电科仪
上海仪电科仪
梅特勒托利多
梅特勒托利多
聚光科技
聚光科技
莱伯泰科
莱伯泰科
盛瀚
盛瀚
多宁生物
多宁生物
丹东百特
丹东百特
科哲
科哲
卓立汉光
卓立汉光
屹尧科技
屹尧科技
华谱科仪
华谱科仪
宝德仪器
宝德仪器
优莱博
优莱博
HORIBA
HORIBA
布鲁克核磁
布鲁克核磁
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...