【求助】紫外分光光度计测亚硝酸盐

3 电极法
用硝酸根电极法测定蔬菜硝酸盐氮，只要熟练掌握电极的使用和维护，提供测试过程所需的各项条件，可以得到准确的分析结果。从回收率、精密度及与经典方法的对比结果表明，该方法满足蔬菜硝酸盐快速测定的各项要求，其配置容易、操作简便、抗干扰能力强，能快速准确地完成大批样品检测，提高分析工作效率。相关的文献报道很多。汪建飞等［9］于2003年就开始对硝酸根电极法测定蔬菜中硝酸盐含量的方法进行了研究，从而确定了测定条件及适用范围。与此同时还与其它分析方法进行了比较实验（酚二磺酸比色法、硝酸试粉比色法），测定蔬菜硝酸盐含量的结果表明，电极法测定蔬菜硝酸盐含量线性范围宽，硝酸盐含量在8×10-5～8×10-1mol/L之间都可被直接测定，回收率为97.53～103.76%。该方法简便快速、成本低，使用的硝酸根电极内阻小、反应快、选择性较好，在适当的掩蔽剂存在下可以直接测定复杂样品中硝酸盐的含量，为检测提供一个快速准确的操作规程。姚建武等［10］将新鲜蔬菜样品用清水洗净，毛巾吸干表面水分，切碎后用打浆机打成糊状；称2.00g样于50ml烧杯中，加10ml水，在磁力搅拌器上搅拌3min，再加10ml缓冲液搅拌1min；调低搅拌速度，插入硝酸根电极与参比电极，1min后读其电位值E1，用半微量注射器加入1mol/L硝态氮标准溶液0.20ml，低速搅拌，同上读出电位值E2。采用标准加入法。硝酸根电极测量待测液在添加标准溶液前后的2次电位（E1和E2），用下列公式计算待测液浓度（CX）：
CX=VSCSVX-1（10（E2-E1）/S-1）-1
式中：VS为添加标准溶液的体积、CS为标准溶液的浓度、VX为待测液体积、S为电极的实测斜率。
4 离子色谱法
随着现代大型科学仪器的飞速发展及其应用范围的广深性，采用离子色谱法测定新鲜蔬菜中的NO2-和NO3-含量具有简便、选择性好、灵敏度高、准确度高等优点，该法无需添加任何化学试剂，分析速度快，一次进样能同时测定多种阴离子，较适合蔬菜中亚硝酸盐和硝酸盐的批量检测，同时也能减少实验中的有毒有害试剂对环境的影响。沈宏等［11］取有代表性的植株，先用自来水清洗3次，然后用蒸馏水清洗3次，再用去离子水清洗5次；用滤纸吸干表面水分，选取典型部位将其剪碎；称取植株鲜样1g，加入2ml去离子水，再加入少量石英砂，将其研磨成浆，再加入3ml去离子水，将其洗入离心管中。在0℃、转速为9000r/min条件下离心0.5h；将上清液过滤到指形管中，然后将其过XAD系列树脂层析柱；用1mmol/L HCl洗脱，将洗脱液过葡聚糖凝胶层析柱；再用部分收集器分管收集、微孔滤膜过滤立即分析或放入冰箱（4℃）备用；以甲醇作为有机改性剂，30mmol/L NaOH+甲醇15%为淋洗液，用离子色谱同时分析菜豆有机酸和无机阴离子。结果表明，该方法能同时分析菜豆根部和叶部的NO3-、NO2-等物质。其检测限为0.02～0.40mg/L，线性工作范围为2～120mg/L之间，相对标准偏差低于10%，相关系数在0.9354～0.9984之间，样品加标回收率为（100±10）%。与Na2B4O7或Na2CO3/NaHCO3作淋洗液相比，该法准确、方便、快速且不受干扰，测定结果令人满意。张莹等［12］取5g新鲜洗净蔬菜样品于捣浆机中捣碎，加100ml去离子水浸泡，加入1N NaOH调节pH至8.3，置于80℃恒温振摇提取约0.5h，离心过滤，滤液定容至150ml，取5ml过sep-pak C18预柱（日本Waters公司）净化，再取滤液过微孔滤膜，滤液进行HIC分析（使用HIC-6A高效离子色谱仪）。蒋蓉等［13］称取新鲜蔬菜样品10g于研钵中，研磨匀浆，用50ml浓度为0.01mol/L NaOH溶液洗入有盖锥形瓶中，在超声条件下提取10min，静置，倾取上清液于离心管中，在转速为10000r/min的条件下离心分离10min，备用。将石墨化炭黑柱（ENVI-CARB）（Supelco）用5ml纯水洗涤后，将样品溶液上柱，弃去前2ml流出液，收集后5ml样品溶液于AS40自动进样器进样管中，经0.45μm过滤器过滤后，自动分析。用离子色谱法/电导检测器测定蔬菜和水果中亚硝酸盐和硝酸盐含量，优化了分离条件，以3.5mg/L Na2CO3-1.0mg/L NaHCO3为淋洗液，100μg/ml Cl-和0.50μg/ml NO2-能得到良好的分离。相对标准偏差：NO2-为1.5%，NO3-为0.61%；回收率：NO2-为97%～102%，NO3-为96%～104%。杨敏等［14］建立了化学抑制电导检测离子色谱法定性定量分析蔬菜硝酸盐含量的方法。阴离子分离，流动相为1.7mmol/L NaHCO3/1.8mmol/L Na2CO3。流速1.2ml/min，自动连续再生抑制装置SRS-UL TRA。线性范围为0.1～100.0mg/L，线性关系为0.9997，检出限为0.05mg/L。应用此法，测定了多种蔬菜硝酸盐含量。方法操作简单、快速、基体干扰少、灵敏、准确。称取蔬菜样50.00g于组织搅拌机中，加水150ml，搅拌2min，以0.005～0.01mmol/L NaOH溶液50ml，沿杯壁冲洗菜样，搅拌1min，转入烧杯中，于70℃水浴中加热30min，冷却至室温，用布氏漏斗过滤，以及冲洗，定容体积为500ml，取部分滤液，以0.45μm滤膜过滤。样品测定结果表明，离子色谱法与国际法相比，NO3-含量测定平均值误差均不超过±5%，但标准偏差小于比色法，说明离子色谱法测定蔬菜NO3-含量准确度高，重复性良好，具有简单、快速、灵敏等优点，可用于蔬菜生产销售中硝酸盐含量监测的定性定量测定。王守箐［15］也以西红柿为例，应用离子色谱建立了一种快速有效的检测硝酸盐和亚硝酸盐的方法。
5 结语
综上所述，可以看出，对蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的分析手段逐渐复杂。可以预见，随着人们各种安全意识的增强，以及现代仪器自动化和测试技术的发展、普及和完善，对蔬菜中硝酸盐和亚硝酸盐的分析研究也将会增加，而且测定方法必将趋于更加简单、快捷、灵敏和高效。◇

参考文献
［1］宾士友，阮月燕，蔡耕鸣. 广西蔬菜水果硝酸盐含量状况与控制措施. 广西农学报，2006，21（1）：23-25.
［2］GB 18406—2001.
［3］王钫，王卫平，华楚衍. 杭州市场蔬菜硝酸盐含量分析及质量评价. 浙江农业学报，2004，16（5）：271-273.
［4］崔令强，孟慧，唐正松. 济宁市33种市售蔬菜中亚硝酸盐含量测定. 济宁医学院学报，2003，26（4）.
［5］汪李平，向长萍，王运华. 武汉市场蔬菜硝酸盐含量状况及食用卫生评价. 湖北农业科学，2003，3：71-72.
［6］宠荣丽，方金豹，袁国军. 郑州市主要蔬菜和水果硝酸盐污染状况调查. 中国农学通报，2006，22（2）：297-300.
［7］罗雪华，蔡秀娟. 紫外分光光度法测定蔬菜硝酸盐含量. 华南热带农业大学学报，2004，10（1）：13-16.
［8］王心宇，项新华，涂晓明. 紫外检测-离子色谱法测定食品中的硝酸盐和亚硝酸盐. 化学分析计量，2002，11（2）：28-29.
［9］汪建飞，陈世勇，邢素芝. 电极法测定蔬菜中硝酸盐的方法研究. 甘肃农业科技，2000，5：39-41.
［10］姚建武，艾绍英，谢梅芳. 用硝酸根电极快速测定蔬菜中的硝酸盐含量. 土壤肥料，2006，1：48-49.
［11］沈宏，严小龙，郑少玲. 菜豆有机酸和无机阴离子同时分析的离子色谱法. 华南农业大学学报，2001，22（2）：8-10.
［12］张莹，陈波. 高效离子色谱法测定食品中的硝酸盐及亚硝酸盐. 中国国境卫生检疫杂志，1996，19（4）：217-218.
［13］蒋蓉，金玉娥，汪国权. 离子色谱法测定蔬菜、水果中的亚硝酸盐和硝酸盐. 分析仪器，2003，4：29-31.
［14］杨敏，林国剑，钟国华. 离子色谱法测定蔬菜硝酸盐含量. 理化检验-化学分册，2005，41：412-414.
［15］王守箐. 离子色谱法测定蔬菜中亚硝酸盐和硝酸盐的含量. 上海蔬菜，2005，4：13-14.

作者简介：贾丽（1980～ ），女，研究实习员，研究方向为食品分析。