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【讨论】为何PDA扫描蛋白（BSA ,HSA）的吸收图谱在280nm处基本无吸收

毛细管电泳（CE）

  • 如题,最近用BECKMAN的MDQ做了BSA和HSA的分离,发现二者在280处基本没有正吸收,而几乎所有的生化教材都告诉我们大多数蛋白在280处吸收强烈,可作为蛋白定量的检测波长.当然毛细管电泳是在柱检测的,管内径很小(几十微米,而紫外吸收池是1厘米的),不知道这是否是问题所在?
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  • 该帖子已被版主-sunpengwjh加3积分，加2经验;加分理由:鼓励提问！
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    +关注 私聊

  • sunpengwjh

    第1楼2009/11/13

    建议找一下最大吸收，看看偏差多大！有DAD检测器么？如果没有就用紫外课可以，可以做一下全扫描！

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  • i_am_ling

    第2楼2009/11/13

    我们也是紫外检测器，所以每次都是先溶解样品在紫外上检测一下最大吸收波长！然后在上仪器！

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  • cpudaxiao

    第3楼2009/11/16

    有DAD的，扫描结果就是在220nm处有最大吸收，和经典教材的明显不一样，原因未知。

    sunpengwjh(sunpengwjh) 发表:建议找一下最大吸收，看看偏差多大！有DAD检测器么？如果没有就用紫外课可以，可以做一下全扫描！

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  • sunpengwjh

    第4楼2009/11/18

    建议还是选用自己测试的结果吧，有些文章可信度也不是很高的！

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:有DAD的，扫描结果就是在220nm处有最大吸收，和经典教材的明显不一样，原因未知。

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  • cpudaxiao

    第5楼2009/11/21

    是啊，我的样品都是sigma的标品，应该没什么问题，可能和仪器的性能也有关系。

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