液相色谱(LC)
有水有渝
第1楼2010/02/21
1、排阻极限是指不能进入凝胶颗粒孔穴内部的最小分子的分子量。所有大于排阻极限的分子都不能进入凝胶颗粒内部,直接从凝胶颗粒外流出,所以它们同时被最先洗脱出来。排阻极限代表一种凝胶能有效分离的最大分子量,大于这种凝胶的排阻极限的分子用这种凝胶不能得到分离。例如Sephadex G-50的排阻极限为30,000,它表示分子量大于30,000的分子都将直接从凝胶颗粒之外被洗脱出来。 2、一个是色谱柱选择不合适,一个是流动相不合理,如组成成分,PH,流速,温度等也有影响。
grz
第2楼2010/02/22
感谢xky0230699将军,那么对于G-10排阻限度为700D来说,是不是从700D往下才正常出峰,而700D以上的就是快速流出,反映到图上会是什么情况呢,再比如样品是,500D以下99.2%,650D左右0.1%,700~1000D左右0.2%,其他为1000D以上。还有一个问题,Sephadex G-15 分离:肽及球形蛋白质:100~1500;葡聚糖(线性分子):100~1500 ;这两个指标能给解释一下吗? 再次感谢!
tigertooth
第3楼2010/02/22
排阻限是有最低和最高排阻限的,在其间的可以分离,其外的不能分离或分离不好。
第4楼2010/02/22
在出峰上,不能进入的成分会是什么反映呢
第5楼2010/02/22
1、不能进入的表现出峰很快,几乎与死体积相当。2、Sephadex G-15 分离:肽及球形蛋白质:100~1500;葡聚糖(线性分子):100~1500 :就是指分析此类样品的适用范围了。
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