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【求助】做毛细管电泳电化学发光的

lhj666

2010/03/27

毛细管电泳（CE）

用毛细管电泳电化学发光分离苦参碱和氧化苦参碱，为什么老是分不开呢？用得磷酸盐缓冲，PH6-10的都用了，硼酸缓冲也试了，就是分不大开。苦参碱的光信号峰很大，而氧化苦参碱则很小，两者配比优化了也不怎么能分开，基本上重叠在一块，而且氧化苦参碱信号很弱。看文献上两者分离挺好的，为什么我老是分不开呢，也没找出原因，郁闷死了。大家有知道得不?多谢了哈！

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i_am_ling

第1楼2010/03/28

楼主优化了很多条件，都优化了那些条件？pH进过优化确定的，还是参考文献的？

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lhj666

第2楼2010/03/28

优化了运行缓冲液的的浓度(10,15,20,50mmol/L)，pH值（6-10），先试的参考文献上的不理想，然后又自已优化的也不大好。
i_am_ling(i_am_ling) 发表:楼主优化了很多条件，都优化了那些条件？pH进过优化确定的，还是参考文献的？

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sunpengwjh

第3楼2010/03/29

不太理想就是有分开的迹象了？只优化了缓冲溶液浓度和pH对分离的影响么？其他的条件没有进行有化么？楼主能否经自己分离最好的谱图上传一下，看看谱图！
lhj666(lhj666) 发表:优化了运行缓冲液的的浓度(10,15,20,50mmol/L)，pH值（6-10），先试的参考文献上的不理想，然后又自已优化的也不大好。

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spying

第4楼2010/03/30

一个很大一个很小,差很多么？你确定那个小的也是物质的峰么？还是那个大的峰时这两个组分的，只不过没有分开？
lhj666(lhj666) 发表:用毛细管电泳电化学发光分离苦参碱和氧化苦参碱，为什么老是分不开呢？用得磷酸盐缓冲，PH6-10的都用了，硼酸缓冲也试了，就是分不大开。苦参碱的光信号峰很大，而氧化苦参碱则很小，两者配比优化了也不怎么能分开，基本上重叠在一块，而且氧化苦参碱信号很弱。看文献上两者分离挺好的，为什么我老是分不开呢，也没找出原因，郁闷死了。大家有知道得不?多谢了哈！

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i_am_ling

第5楼2010/04/06

楼主的进展怎么样了？问题解决了么？
lhj666(lhj666) 发表:用毛细管电泳电化学发光分离苦参碱和氧化苦参碱，为什么老是分不开呢？用得磷酸盐缓冲，PH6-10的都用了，硼酸缓冲也试了，就是分不大开。苦参碱的光信号峰很大，而氧化苦参碱则很小，两者配比优化了也不怎么能分开，基本上重叠在一块，而且氧化苦参碱信号很弱。看文献上两者分离挺好的，为什么我老是分不开呢，也没找出原因，郁闷死了。大家有知道得不?多谢了哈！

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plf0717

第6楼2010/04/10

我也是做CE-ECL的，

样品分不开必须从电泳方面找原因；分离电压、电泳PH、电泳缓冲液添加剂的选择等等。

发光信号不强得从柱后考虑了；检测电位、柱后缓冲液PH、电极的处理以及电极与毛细管之间的间距等等。

祝你成功！

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