【求助】求助：液相检测相关问题！

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2010/04/13

私聊

液相色谱（LC）

准确称取于120℃干燥至恒重的无水芦丁(作黄酮标准对照)9.5 mg,用60%的乙醇定容于50mL容量瓶中,摇匀,得到浓度为0.19 mg/mL的标准品溶液,作为贮备液备用。准确量取此液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 mL于25 mL容量瓶中,分别加5%亚硝酸钠和10%硝酸铝溶液各0.3mL,放置6 min。加1 mol/mL氢氧化钠溶液4.0mL,分别用30%的乙醇稀释至刻度,混匀,放置16min。用紫外分光光度计在510 nm处测定吸光度。

如上述显色实验，为什么要配置浓度为0.19 mg/mL的标准品溶液，而不是其他浓度（多少浓度范围内遵循朗伯比尔定律？）。别加5%亚硝酸钠和10%硝酸铝溶液各0.3mL,放置6 min。加1 mol/mL氢氧化钠溶液4.0mL, 显色原理是什么，各溶液用量有什么要求？各溶液用量之间是否有内在关系？显色时间有什么要求？还有就是混匀,放置16min 为什么要放置16min？如何放置？在容量瓶中放置？容量瓶塞需打开还是塞上？
还有就是在做实验中植物黄酮提取，显色后，进紫外分光光度计测量时，分光度总是跳动不稳定。老师说需离心，究竟离心的目的是什么？难道是沉淀
Al(no3)3? 不过离心后含试样的溶液会有好多沉淀，而参比液几乎没有沉淀，沉淀是什么物质，是否含有大量黄酮类物质，从而影响实验准确度？
究竟如何解决A值跳动的症状（紫外分光光度计没问题）？
还有就是显色溶液是否要现用现配，是否用量，及其浓度都要精密控制？
还有就是吸光度测量的重复试验，每份重复三次，指的是需重新取样提取黄酮物质，再显色测吸光度，还是显色过后，取试液与三比色皿中，测量三次吸光度？
还有就是稳定性实验，为什么要做？

我是一名学生，刚刚入手实验，有很多不明白的地方，请各位前辈不吝赐教，