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第2楼2010/04/19
1、原理
原花青素易溶于含羟基的溶剂如甲醇等,本方法是将样品中的前花青素,用甲醇提取,加入盐酸家温水解后将其转化为深红色氰定(C15H10O6·HCL)后进行高压液向色谱测定。
2、试剂:
2.1二氯甲烷 分析纯
2.2甲醇 色谱纯
2.3异丙醇 分析纯
2.4甲酸 分析纯
2.5盐酸 分析纯
3、检验方法
3.1样品 称取约500mg油溶性样品于100ml锥形瓶中,加入5.0ml二氯甲烷,振摇使其溶解。加入45.0ml甲醇,振摇5min后过20μm滤膜。取5.0ml滤液于25ml容量瓶中,加入5.0ml3mol/L盐酸,振摇并用异丙醇定容至刻度。立即过5μm滤膜,取出一部分置于试管中,塞紧瓶塞并在100±5℃烘箱中放置45min进行水解,取出后放置至室温后进行液相色谱分析。
3.2标准 除称取25.0mg标准品于100ml锥形瓶中外,其余步骤均同样品。
3.3定量方法 标准曲线外标法定性定量分析。
4、色谱分析条件
4.1流动相:水:甲醇:异丙醇:甲酸=73:13:6:8
4.2检测波长:525nm
4.3色谱柱:岛津Shim-Pak CLC ODS 15cm×6mm
4.4柱温:35℃
4.5流速:1ml/min