【求助】求孔雀石绿在水产中的前处理方法，谢谢

我想问你一下！你要这个干什么ma

查阅附件，是SPE做孔雀石绿的检测！

谢谢你，这个资料我已经有了。

样品制备(肉 1:20 稀释)

1 鱼虾去皮取肉，用匀浆器均质样品，称取5g均质好的样品置于离心管中
2 加入10 mL乙腈，振荡器震荡30分

3 4000g离心10分钟

4 轻轻倒出上清, 移入到另一个离心管。

5 用3ml乙腈活化氧化铝柱（1-2滴/秒）。

6 取3ml样品过柱。

7 收集样品于一干净试管中。

8 加入3ml乙腈洗柱并收集与上述步骤7试管中。

9 利用样品稀释液1：10的比例稀释洗脱物（50ul+450ul），待用。

第二种前处理方法： (1:10 稀释)

1. 样品均质后称取4g于离心管中；

2. 加入5ml 0.2MHCL，充分混合5min；室温2000g离心5min

3. 吸取2.5ml上清液，加入5ml二氯甲烷 ，充分振荡2分钟；

4. 室温2000g离心5min，去除上层液体；

5. 转移2.5ml下层液体于另外一只玻璃试管中，50-60℃氮流蒸发；

6. 残留物溶于2ml乙腈，摇匀；

7. 用样品稀释液将混合洗出液稀释10倍（50ul乙腈提取液+450ul样品稀释液）；

8. 移取75ul进行分析。

第三种前处理方法： (1:5 稀释)

1、 在一个20ml的离心管中称取1克鱼虾样品。

2、 加入10ml乙酸乙酯/乙酸提取液（1ml冰乙酸 +99ml乙酸乙酯）

3、 使用涡旋震荡器充分震荡，最好组织都溶解成细小粉末，每个样品要震荡2分钟。

4、 把离心管放在震荡器上震荡30分钟。

5、 4°C 2,000g 或3500rpm离心10min。

6、 取1ml上清到新的管中，60C氮气吹干。

7、 用50ul乙腈溶解干燥物，可以适当震荡，允许孵育30分以便更好的溶解，然后加入450ul样品稀释液，震荡混匀。

8、 取75ul待测

稀释倍数为5

谢谢您给我提供的方法，我回头试试。非常感谢

4.1提取和净化
提取：准确称取已捣碎的样品5.00 g于50 mL离心管中,先加入孔雀石绿、结晶紫快速检测前处理试剂盒中的提取剂1*(液体20.0 mL)，用匀浆机以8 000 r/min的速度均质30 s，再加入提取剂2*(固体粉末), 振荡1 min,4 000 r/min离心5 min。
净化：层析柱依次用2mL乙腈酸溶液(2.4)、5mL甲醇酸溶液（2.5）、5mL蒸馏水激活，再取上清液5mL于50mL试管中，加入10～15mL水混匀， 分次加入孔雀石绿层析柱中，用吸耳球从上口挤压加快流速或用固相萃取机从下抽真空，液体流完后加5mL乙腈水溶液（2.6）洗涤，挤干柱中液体，用 0.8mL乙腈酸溶液（2.4）洗脱，收集洗脱液，用缓冲液（2.7）定容至1mL。微孔滤膜过滤，滤液供仪器测定。