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【求助】标准曲线相关度高,但是重现性差该怎么办?

  • higher1983
    2010/05/09
  • 私聊

紫外可见分光光度计(UV)

  • 最近在做标准曲线时,每次的r都大于0.999,但是曲线的表达式差别较大,尤其截距变化大。请问是什么原因造成的?该怎么解决?谢谢!
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  • 初学者&九点虎

    第1楼2010/05/09

    楼主把曲线斜率截距传上来看看,其实截距对结果的影响很小的
    主要是斜率变化不大就行了,先传上来看看吧

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  • higher1983

    第2楼2010/05/09

    斜率 截距 R^2
    0.6803 0.0211 0.9994
    0.7608 0.0174 0.9997
    0.7178 0.0672 0.9994
    0.7152 0.0288 0.9989
    然后我计算了一下RSD,在最低浓度的时候达到了30%!这样是不是就不能用了啊?
    难道我要每次测样品的时候都同时做曲线?

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  • tutm

    第3楼2010/05/09

    是不是你标准溶液吸光度都比较高?比较简单的办法是在配标准溶液时,在吸光度低的区域增加1-2点(吸光度0.1左右);要不就是你的参比有问题了,零点不稳定。

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  • 祥子

    第4楼2010/05/09

    是啊,截距应该反应的是零点。零点稳定吗?

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  • higher1983

    第5楼2010/05/09

    我的吸光度最低到过0.038,最高到过1.044。我会再试着多做几个点的,到时候再看结果会如何。
    少数时候出现吸光度不稳定(波动在0.02左右)我就重做了。我现在也在怀疑空白的问题,感觉每次调零前的空白数值都不一样,这样是不是就等于后面每个浓度减掉的数值也不同了?但是空白出问题的原因始终不明白。。。
    我在想能不能只用用到的有机溶剂作空白?其他的试剂都不加?如果这样还出问题又该如何解决?

    tutm(tutm) 发表:是不是你标准溶液吸光度都比较高?比较简单的办法是在配标准溶液时,在吸光度低的区域增加1-2点(吸光度0.1左右);要不就是你的参比有问题了,零点不稳定。

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  • higher1983

    第6楼2010/05/09

    我的空白样放进去后基本上稳定,有个别时候不稳定我就重做了。但是调零前的值会不同。。。

    祥子(nemoium) 发表:是啊,截距应该反应的是零点。零点稳定吗?

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  • tutm

    第7楼2010/05/09

    会不会溶液内有极细小的气泡?
    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20090514/1889188/

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  • 祥子

    第8楼2010/05/10

    你测吸光度时,是只用一个比色皿,还是?

    你的仪器预热一般多长时间呢?

    你仪器的厂家、型号呢?

    如果你只测一个浓度的试样的吸光度,看看重复性怎么样。比如,一个浓度的试样,每隔5分钟读一次吸光度,读上四次。看值变化大不大。

    你说各个曲线的表达式差别比较大,那建立各个曲线时,相隔时间长吗?

    higher1983(higher1983) 发表:我的空白样放进去后基本上稳定,有个别时候不稳定我就重做了。但是调零前的值会不同。。。

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  • higher1983

    第9楼2010/05/10

    今天又做了一次,还是同样的问题。。。
    只用了一个比色皿。机子用的人多,有时是开了挺久的,有时是刚开机就测的。
    机子是北京普析的TU1810
    这个我明天再试试吧...
    我这几天几乎每天都出一条曲线

    祥子(nemoium) 发表:你测吸光度时,是只用一个比色皿,还是?

    你的仪器预热一般多长时间呢?

    你仪器的厂家、型号呢?

    如果你只测一个浓度的试样的吸光度,看看重复性怎么样。比如,一个浓度的试样,每隔5分钟读一次吸光度,读上四次。看值变化大不大。

    你说各个曲线的表达式差别比较大,那建立各个曲线时,相隔时间长吗?

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  • higher1983

    第10楼2010/05/10

    我看了你给的帖子,然后又观察了一下,有时候会有“气泡”,但不是倒溶液产生的,而是因为我测的是做过萃取后的有机溶剂,但有时候一些水混进来后被挤压在比色皿壁上形成的水泡。不知道这会不会影响测定?

    tutm(tutm) 发表:会不会溶液内有极细小的气泡?
    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20090514/1889188/

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