f0831
第3楼2010/05/10
多谢高手指点!
但是我们课题组的老教授都是在用高压,都是用的二元泵,
他们也没有把溶剂预混,而是用两个泵泵进去,他们说怕人工手工配的溶剂比例不准确。
请问,您做哪方面研究的?我们课题组都是做有机小分子不对称合成的,对仪器方面不够专业,还请赐教!多谢了!
pandora98
第4楼2010/05/10
呵呵,我们是做CRO/CMO的,平时做很多手性样品的分析。
其实做分析需要的是重复性,准确性还在其次,也就是说你开发的方法配制的流动相,别人同样方法去配制的时候样品的保留时间能够很好的再现出来。二元泵混合确实要比手动混合精确,但是我们平时配制流动相都用量筒和移液管,我感觉柱温对保留时间的影响要比流动相手动混合还是仪器混合的影响要大的多,两个人同一个方法手动混合的流动相保留时间相差不大,但是在没有柱温箱的情况下,有可能同一瓶流动相白天和晚上的保留时间能差两三分钟。
两个泵混合流动相还有混合不充分的可能,因为正相的乙醇尤其是异丙醇粘度比较高,我们手动混合完的流动相都要充分的摇匀才能用,其实最好是能超声振荡。
f0831
第5楼2010/05/10
我以前也做CRO的,现在在高校做基础研究,我们注重的是准确性,对低含量物质的检测要求比较高。
听您的建议柱温箱是一定要买的,只是泵到底用单泵还是双泵还要考虑考虑。
你们做手性样品分析用的是什么仪器?什么配置啊?
需要在线脱气机和混合气嘛?麻烦帮我问问哦,先谢过!
pandora98
第6楼2010/05/10
我前面说的准确性是指流动相浓度的准确性,只要样品保留时间的重复性好,对检测结果的准确性没有什么影响。即便是流动相比例相差较多,保留时间有些变化,只要能基线分离,也不会对纯度有太大影响,基本上可以完全忽略不计。
如果需要准确定量,检测器灵敏度不能太差,不过一般的检测器只要是新的,光路没有老化就行。还有就是最好有在线脱气,在线混合我有点信不过,现在的趋势是混合器越做体积越小,以便于减小梯度的延迟体积,不过很多仪器都有体积比较大的在线混合器,岛津的混合器还可以选择不同的混合体积,混合器体积越大混合效果越好。
有钱的话最好是能配DAD检测器,一方面可以确定最佳检测波长,以提高检测方法的灵敏度,另一方面当样品纯度差的时候,可能会有多个峰被分离出来,借助DAD检测器可以看紫外吸收曲线,紫外吸收曲线不一样的峰肯定不是手性异构,但是吸收曲线一样的不一定是手性异构。很有钱的话就再串联一个旋光检测器,旋光检测器可以大致看一下是旋光值的正负,帮助你判断手性异构有没有分开。
我们做手性分析用了一台实验室最老最旧的岛津,只有一个单泵,配一个DAD检测器,光路老化的厉害,开发方法可以,但是准确定量就要用比较新的安捷伦了。