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【求助】样品溶液的颜色太深,不能直接进行HPLC分析,为什么?

  • yilishanshan
    2010/05/19
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 请问下大家,是不是样品溶液的颜色太深,不能直接进行HPLC分析,为什么?
    我用超声法处理了沙氏培养液培养的虫草菌粉,样品溶液呈和培养基差不多的颜色,棕红色,不知是否需要脱色处理,才能HPLC分析,若直接HPLC分析,会有什么后果?
    还有,我采用短的柱子,出峰时间是13min,用长的柱子,出峰时间竟然要25min,有什么办法缩短出峰时间,我想提高流速应该影响不大,是不是应考虑换流动相呢?
    希望大家帮我解答下!谢谢
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  • 有水有渝

    第1楼2010/05/19

    应助达人

    没有必要脱色,但要保证进入的样品不会有成分析出,不会污染色谱系统,同时所有成分都能被洗脱出来。

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  • yijianfeixian

    第2楼2010/05/19

    只要是澄清透明的,不会堵塞柱子就可以了,何必追求脱色

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  • 儒雅凤

    第3楼2010/05/20

    样品是否需要脱色处理,主要看其色素是否影响主成分的测定;其次是色素是否沉积在色谱柱上,不易洗脱。如果不存在上述因素,可以不考虑脱色处理。

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  • 21kgtan

    第4楼2010/05/20

    我采用短的柱子,出峰时间是13min,用长的柱子,出峰时间竟然要25min,有什么办法缩短出峰时间,我想提高流速应该影响不大,是不是应考虑换流动相呢?


    就像跑步,同样速度,你跑的距离短,需要的时间肯定少啊
    你可以提高方法的起始浓度,相当于把起跑线往前推,那你用的时间不就少了。但要注意不要超过样品洗脱浓度,否则会不挂柱

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  • 1818

    第5楼2010/05/20

    应该影响不大吧!我们做中成药的时候色都是很深的,也没有什么影响啊!!

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  • chinapeptide

    第6楼2010/05/20

    颜色深太正常了,我做荧光素的肽颜色种类不要太多,只要溶解性好不析出就没有问题了。

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  • 阿宝

    第7楼2010/05/20

    没听说过颜色深不能做液相分析的。只要是没有固体颗粒就应该问题不大

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  • edward0854

    第8楼2010/05/21

    長柱子走得久一點不是很正常嗎?

    虫草菌絲體應該是跟藥典做吧. 沒有必要換方法啊

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  • xydell

    第9楼2010/05/21

    如果目标化合物都得到很好的分离,那用短柱子不是很好吗?为什么又要换成长柱子?

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  • 小不董

    第10楼2010/05/22

    应助达人

    是否有颜色不是判断能否进HPLC的标准,而是样品中是否完全溶解,是否会堵塞柱子。你可以用0.45um的过滤膜过滤后进样。如果你要分析的成分本身就有颜色,你脱色后,那还分析什么呢?

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