【求助】氨基酸检测检测方法？

用气相恐怕不好做出来吧！！用液相衍生法能够做得出来

应助达人

气相色谱用专门的氨基柱不知道能不能做，好像没有见过气相的相关文献，估计很难，楼主有什么原因要用气相呢？

GC做效果不好，很早之前就有人做过了，另外HPLC做的话，对人的经验的要求非常高，需要有非常老道的经验才可，否则重现性不是很好，一般适合内部做研究用，如果想省事且做的准点的话，最好还是用专用的氨基酸分析仪，但是仪器专用性非常高，价格也不便宜。

18种氨基酸的HPLC测定，查查相关文献吧，用HPLC做这个的人太多了。我03年就做过柱前衍生法HPLC测定18种氨基酸。

有专门的“氨基酸HPLC色谱包”卖，也不贵，里面有色谱方法，色谱柱、相关试剂、氨基酸对照品（要对照可能会贵一些）。

看过一篇文献上说分析氨基酸的方法包括衍生化离子交换色谱法、衍生化高效液相色谱法、衍生化气相色谱法和衍生化毛细管电泳法，但感觉还是衍生化液相色谱法用的多一些

您要检测氨基酸的ee值吗？液相方法可以直接检测大部分的。衍生化后可以全部检测的。

做氨基酸常用的有两种方法，一种是用专门的氨基酸分析仪，比较方便，但成本太高，一套氨基酸分析仪价格一般六七十万。一、第二种方法就是液相色谱仪+柱后衍生仪来做，原理上来讲都是一样的。
氨基酸一般都是用衍生的方法来做，常用的有柱前衍生和柱后衍生，柱后衍生是比较经典的方法。
柱后衍生也分为茚三酮衍生和OPA衍生两种，前者的优点是可检测氨基酸种类多，缺点是检出限不够低，在PPM级别，后者的衍生方法有点是大大提高检出限，缺点是可检测氨基酸种类比较少。
你可以对比选择合适的方法

流动相A（0.1mol/L醋酸钠/乙腈＝93/7）： 称取无水醋酸钠15.17 g，加水1850ml，溶解后用冰醋酸调pH至6.5，然后加乙腈140 ml，混匀，用0.45mm滤膜过滤。
流动相B：乙腈
时间(min) 流速(ml/min) B%
0.00 1.00 0.0
11.00 1.00 1.0
17.00 1.00 13.0
32.40 1.00 33.0
32.42 1.00 100.0
37.00 1.00 100.0
37.02 1.00 0.0
43.00 1.00 0.0
1．    1mol/L三乙胺乙腈溶液：取三乙胺16.1mL，加乙腈100mL，混匀。
2．    0.1 mol/L 异硫氰酸苯酯（PITC）乙腈溶液：取PITC 50mL，加乙腈4mL，混匀。
3．    内标溶液（1mg/ml）： 精密称取L-4-Hydroxyproline 150 mg，加0.1mol/L盐酸溶液 500 ml溶解。
一.    氨基酸对照品溶液的制备
分别精密称取16种氨基酸适量，+ 0.1mol/L盐酸→1000ml，作为氨基酸对照品贮备溶液，充氮，至冰箱中保存。（供试品溶液的制备：精密量取供试品5.0ml+水→50ml，作为供试品溶液。
二.    对照品溶液和样品溶液的衍生
分别取放置至室温的氨基酸对照品溶液及供试品溶液各200mL，置同一1mL塑料离心管中，加内标溶液200mL，加入1mol/L三乙胺乙腈溶液100mL，0.1 mol/L 异硫氰酸苯酯（PITC）乙腈溶液100mL ，混匀，室温放置1小时,加入正己烷400mL，振荡后静置10分钟,取下层溶液，用0.45mm样品滤器过滤，取滤液2mL进样分析。

氨基酸检测最早是用氨基酸分析仪，不过早过时了，现在用HPLC的比较多，采用HPLC柱后衍生的方法，不过弊端太多，做初步的检测还可以，但做科研课题就不行了。最好的方法是用质谱技术。多达42种氨基酸的含量测定，采用质谱技术并使用44种氨基酸同位素对内标，精确度和重复性都有很好的保证，和传统的毛细管电泳法、HPLC法、氨基酸分析仪比较，无论是从精度上、还是检测的范围上和检测结果的准确度上都有了很大的提高和改善。
检测氨基酸的种类有：
一：必需氨基酸：
精氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸（蛋氨酸）、苯丙氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸。
二：必需氨基酸衍生物（神经内分泌新陈代谢）：
γ-氨基丁酸、甘氨酸、丝胺酸、牛磺酸、酪氨酸。
三：氨/能量新陈代谢：
a-氨基已二酸、天门冬酰胺、天门冬氨酸、瓜氨酸、谷氨酸
、谷氨酰胺、鸟氨酸。
四：硫新陈代谢：
半胱氨酸、胱硫醚 、同型半胱氨酸。
五：附加代谢物：
α-氨基正丁酸 、丙氨酸、鹅肌肽 、b-丙氨酸、b-氨基异丁酸、肌肽、乙醇胺、δ-羟基赖氨酸 、羟化脯氨酸、1-甲基组氨酸、3-甲基组氨酸、磷酸乙醇胺、磷酸丝氨酸、脯氨酸、肌氨酸、精氨(基)琥珀酸、羟化瓜氨酸。

为了配合人体全谱氨基酸营养代谢组学的研究，公司成功开发出《全谱氨基酸营养代谢组学分析系统》软件
随着科技的发展和人类的进步，营养代谢组学逐渐进人了现代科学的研究范畴，发展成一门很重要的学科。
代谢组学是继基因组学和蛋白质组学之后新近发展起来的一门学科，是系统生物学的重要组成部分。在营养支持方面代谢组学与系统生物学的其他技术一并用于研究营养表 型(nutritional phenotype)，后者被定义为基因组、蛋白质组、代谢组、功能和行为因素的集成系统。 以前难以完成如此复杂的测定，而代谢组学技术的应用，可以测定许多营养代谢物与疾病及健康的关系。 因此，代谢组学是唯一适合探索营养与代谢复杂关系的研究方法。 　　
氨基酸是人类营养的基础，是最重要的营养组分，因此对氨基酸的研究又是营养组学中最为重要的一环。人类对氨基酸的研究比较广泛和系统。《全谱氨基酸营养代谢组学分析系统》软件正是汇集了这方面的研究资料，给客户一系统的分析参考。
《全谱氨基酸营养代谢组学分析系统》是和全谱氨基酸检测技术相配套的一套软件分析系统。通过对人体内42种氨基酸的精确检测，来揭示人体内详细的氨基酸代谢状况。42种氨基酸不仅包含了8种必需氨基酸、2种半必需氨基酸，同时也包含了20种组成蛋白的基本氨基酸和各个代谢途径中重要的氨基酸，可以从不同的代谢路径中提示人体的健康状况。不管是神经内分泌系统、氨能量代谢系统或者是硫代谢等等，各种代谢途径都可以检测到。是截止目前国际上最科学、最系统、最完善的氨基酸营养代谢组学系统。
《全谱氨基酸营养代谢组学分析系统》通过对全谱氨基酸检测结果的科学分析，和目前科学提供的理论，给客户提示检测结果的临床意义和营养补充调节建议，同时专业医生或者营养师又可以通过软件提供的每种氨基酸的详细代谢图谱来分析各个代谢路径是否出了问题，来进一步的指导。

北京艾米诺医学研究公司 市场专员：丁浩