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【讨论】流动相在线混合的最小比例要求

  • 有水有渝
    2010/06/01
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 液相色谱中,流动相的在线混合提高了分析效率,增加了重复性,其便利性是不言而喻的,但在线混合也有缺点,那就是比例太小时,可能造成比例失真的情况(也就是实际的混合比例可能与设置的比例之间存在较大的差异),同时在线混合也更容易出现盐析现象。在线混合上,高压混合的精度又高于低压混合的精度,那么:
    1、在线混合时,最小比例溶剂的比例应大于多少才是比较合理的,能低于5%吗,高低压的要求一样吗,有什么依据?
    2、高压混合与低压混合,哪一种更容易出现盐析?
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  • 老多_小多

    第1楼2010/06/01

    混合的具体要求没有,但是和泵的梯度精度有很大关系,精度不好,混合比例低,重现性不好

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  • 有水有渝

    第2楼2010/06/01

    应助达人

    精度不好,应该要求比较大的混合比例才行。

    老多_小多(emoc98311) 发表:混合的具体要求没有,但是和泵的梯度精度有很大关系,精度不好,混合比例低,重现性不好

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  • 1818

    第3楼2010/06/02

    高压应该更容易析盐吧!

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  • zouxizhen

    第4楼2010/06/02

    四元泵一起按比例混合效果不好

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  • zouxizhen

    第5楼2010/06/02

    泵的梯度精度如何判定?

    老多_小多(emoc98311) 发表:混合的具体要求没有,但是和泵的梯度精度有很大关系,精度不好,混合比例低,重现性不好

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  • 有水有渝

    第6楼2010/06/03

    应助达人

    可以用5%丙酮做梯度准确度检验。

    zouxizhen(zouxizhen) 发表:泵的梯度精度如何判定?

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  • chiralzh

    第7楼2010/06/03

    如果是缓冲盐,最好是预混合。高压混合比低压混合更容易出现盐析现象。

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  • 海边

    第8楼2010/06/07

    我做过实验,高压二元混合,低于20%时基线噪音很大,压力也有波动。建议不要低于此比例。

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  • 有水有渝

    第9楼2010/06/07

    应助达人

    我用过5%的,感觉还行,还是在低波长下,稳定和保留时间都挺稳定的。流动是相缓冲盐-甲醇(95:5)

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  • duanjiezz

    第10楼2010/06/09

    问题1:混合精度有泵决定的,您可以查看设备的步进梯度实验,其中1%步进梯度实验能够较好回答您的问题,当3次实验的准确度小于0.5%,重复性小于0.1%就说明泵的性能完全达到您的要求了,即1%混合不必顾虑重重。

    问题2:固体物质的溶解度几乎不受压力影响,受温度影响是主要的。根据盐的性质不同,当甲醇水混合,或者乙腈水混合时由于吸热放热不同,才会表现出增加溶解度,或者析出的问题。所以高低压混合不会产生盐析出问题,一般盐在水相中的溶解度很大,即使1%水相99%有机相混合,也不会产生析出,在HPLC生产的时候已经考虑到此种问题,所谓析出是因为在高压下,流动相一点点渗漏出来,溶剂蒸发后,白色的盐就显现出来了,多半会在接口和各种密封圈处。

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