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【分享】分光光度计使用时遇到的一些问题及解决方法

鸿雁

2010/06/01

紫外可见分光光度计（UV）

近日，在做分光光度实验时总是遇到一些问题，查看很多资料后总结了一下我们在使用分光光度计时可能会经常遇到的一些问题，以及他们的解决方法，和大家分享一下，希望对大家有所帮助。如下文所示（同时也做了一份附件，大家如想下载的话就可以下载）：

使用吸光光度计时可能遇到的一些问题及解决的方法

（1）基线飘移：

Ø 检查仪器是否预热，一般需预热30分钟；

Ø 检查流通池内是否存有气泡，并对载流和试剂脱气处理；

Ø 检查光源及光电器件的稳定性；检查试剂是否失效。

（2）背景吸光度太高

Ø 检查流通池是否污染，如若被污染，可用擦镜纸沾上无水乙醇清洗流通池的外壁，泵入5 M的NaOH溶液冲洗池的内壁，然后再用蒸馏水冲洗。

Ø 检查试剂溶液是否被污染了或发生脱色,

Ø 检查波长位置是否正确。

（3）流通池上有沉积物生成：

Ø 使用酸碱或EDTA等溶液清洗流通池，过滤试剂和载流。若是因试剂浓度太高产生的淀积物，可适当降低试剂浓度。

（4）注样后无信号响应：

Ø 除了化学方面的原因外应检查记录仪连接是否正确，然后再进一步检查记录仪响应情况。

Ø 可用一块厚纸片挡住光路，观察记录仪响应情况。

（5）检查波长设定情况。

目视法：将一白纸片放入流通池光路，调节不同的波长，观察射到纸片上光的颜色。波长在540nm，应为绿色，在630nm处，应为红色。

（6）吸光度信号响应不足

Ø 检查记录仪的阻尼和增益调节；

Ø 化学条件方面：试剂和/或试样的pH值是否合适

Ø 标准或试样的配制过程是否正确

Ø 波长设置的是否正确

附件：

分光光度法问题及解决方法 2010.6.1.doc

精
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初学者&九点虎

第1楼2010/06/01

非常感谢楼主的总结，对广大板油很有帮助

0

pfz1985

第3楼2010/06/02

总结的很好，这些都是常见的麻烦

0

yuchenxun830

第8楼2010/06/02

谢谢楼主，这些总结的确在实际工作中可以用到。

0

宁夏恋冰

第9楼2010/06/02

补充下：加样后数值不稳定，忽高忽低一直跳动
原因：氘灯能量耗尽，换氘灯！
仅供参考

0

quin

第21楼2010/06/05

有时会遇到这些问题。

0

初学者&九点虎

第27楼2010/06/11

检查流通池内是否存有气泡，并对载流和试剂脱气处理
这个是对有自动进样器的仪器而言的吧
一般的分光光度计没有自动进样器

0

初学者&九点虎

第28楼2010/06/11

5 M的NaOH溶液冲洗池的内壁
这个好像不太好吧

0

初学者&九点虎

第29楼2010/06/11

记录仪？
没用过，现在基本稍微好一点的仪器都是电脑控制，或有液晶面板显示

0

初学者&九点虎

第30楼2010/06/11

恩，是的，一般软件上会记录氘灯使用时间，可以查看一下
宁夏恋冰(quan0107yan1025) 发表:补充下：加样后数值不稳定，忽高忽低一直跳动
原因：氘灯能量耗尽，换氘灯！
仅供参考

0

fwl117943915

第31楼2010/06/12

总结的很好，这些都是常见的麻烦

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