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【求助】梯度洗脱出不规则的尖峰

化学药检测

  • 色谱条件来自英国药典,梯度洗脱,平衡柱子后连续进两针水,分别如图:
    都有尖峰,并且保留时间,峰面积不同,重复性不好,
    这是为什么?两泵的流动相为:甲醇:水:乙腈:三乙胺,除三乙胺都是色谱纯,并且三乙胺1000ml中只加0.3ml,系统也没有气泡,平衡了一天,第二天还是这样。

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  • 小卢

    第2楼2010/06/23

    上图为楼主的图谱!
    国外药典的梯度系统的确很多,方法重现性也不高,不过原因可能不是方法问题而是自己的原因。
    从图来看:
    1.残留,色谱柱或进样器内存在残留
    2.三乙胺的问题,有销售的色谱级的三乙胺,可以买的到
    3.水是你的溶剂吗?如果不是,建议走针溶剂,比较一下

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  • wjp820505

    第3楼2010/06/23

    水是市售的娃哈哈水,色谱柱和进样器都冲洗过多次

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  • 魔鬼化学人

    第4楼2010/06/24

    梯度洗脱存在一个平衡过程,梯度变化越大,谱图就越看得出,可能是你谱图放的过大,缩小到正常比例后,细节就不那么差异了

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  • yukai4811

    第5楼2010/06/24

    梯度波动属正常
    但是尖峰不正常,似有物质残留,请好好清洗一下系统

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  • 小卢

    第6楼2010/06/24

    很多厂家,甚至是仪器厂家的工程师都希望市售的水,但我总感觉不怎么好!
    试着把水抽滤一下再实验看看!

    wjp820505(wjp820505) 发表:水是市售的娃哈哈水,色谱柱和进样器都冲洗过多次

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  • 千层峰

    第7楼2010/06/24

    很多人都不买纯水机,而自己买饮用的纯水,怡宝和屈臣氏质量会好点,但小心买到假冒的啊。。。

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  • 小卢

    第8楼2010/06/25

    这倒是对的,毕竟实验用水要好注意的!

    jxyan(jxyan) 发表:很多人都不买纯水机,而自己买饮用的纯水,怡宝和屈臣氏质量会好点,但小心买到假冒的啊。。。

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  • figoandshanshan

    第9楼2010/06/26

    所谓的鬼峰。
    1. 多次进样后,如果峰面积有不断下降趋势,则可能是污染物或残留;
    2. 两泵的瓶中,可以这样配置:A瓶装初始状态的流动相,B瓶装终状态的流动相,然后设置梯度试试;
    3. 实验用水最好是超纯水;
    4. 波长可以调整一下试试

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  • 小余儿

    第10楼2010/06/27

    流动相中水的问题,在流动相水比例较大时,水中有机物吸附到色谱柱中,随着有机相的比例增加,残留在色谱柱中的有机物被洗脱出来表示为峰。要解决这个问题请跟换较高级别的水和三乙胺。

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