儒雅凤
第1楼2010/08/09
比较:
UV检测的主要缺点在于紫外不吸收的化合物灵敏度很低。ELSD可以检测任何挥发性低于流动相的样品。ELSD的通用性响应值使得ELSD响应值比UV响应值更能代表样品的质量
不同于紫外检测只能使用不吸收紫外的流动相,ELSD能与任何的挥发性流动相相容,不论其光学特性。您可根据样品的溶解度或分离特性选择流动相,例如选择氯仿和丙酮用于脂类的分离以提高样品的溶解性。用紫外检测器定量未知物是困难的,因为样品的紫外吸收值往往和代表样品的质量的色谱峰的大小无关。ELSD对几乎所有的样品给出一致的响应因子。因此可以通过和内标比较定量未知化合物,此特性对于使用组合化合技术而合成的系列化合物的定量尤其有用。用组合合成技术合成的化合物通常是用HPLC联合低波长紫外或质谱检测进行分析,但是,在缺乏已表面活性剂非常灵敏,并在梯度脱洗下维知结构参数已知的参照标准品情况下,两种方法都不能准确的定量分析此种系列化合物。
荧光检测
荧光检测的主要缺点在于只有少数化合物产生荧光。大多数的分子不发荧光,但含有可衍生的官能团用于合成能发荧光的衍生物,例如,邻苯二甲醛是一种常用荧光基团用于柱后衍生氨基酸。虽然荧光检测很灵敏,但对于常见的样品分析来说不需要如此高的灵敏度。因为ELSD的响应不依赖于荧光基团,所以不需要衍生,因此大大降低了样品预处理和分析时间。
示差检测:
虽然示差检测在原理上是通用型检测器,但是它的灵敏度低,和梯度脱洗不相容,因此它对于HPLC来说不是理想的检测器。室温的变化会影响基线的稳定性,大的溶剂前沿峰可能会掩盖前期脱洗的色谱峰。因为ELSD在检测前将流动相蒸发,所以基线的噪声和漂移都很小,因此基线稳定和样品检测的灵敏度高。流动相的蒸发使得ELSD和梯度脱洗相容,因而可提高色谱分离的分辨率和缩短分离时间。另外ELSD比RI检测蔗糖灵敏度高和基线稳定。
儒雅凤
第2楼2010/08/09
应用实例:
近年来,脂类在生物学和经济领域中的重要性正在日益引起广泛的关注。脂类的分析方法对于许多研究工作,临床使用和质量控制方面都非常重要。大多数的脂类分子都缺乏适当的发色团,因此脂类除非通过衍生化,否则不能用紫外检测。一般但一样品种含有的各种脂类其极性差异很大,弱项要达到个作分的最佳分离和分辨率需要使用梯度脱洗,因而限制了示差检测器的使用。不同于UV和RI的局限性,ELSD是脂类检测的有用工具。
碳水化合物不带有发色团,因而不能用UV来检测。他们通常用氨基柱或者阳离子交换树脂分离。但是示差检测器不是很灵敏,而且需要控制温度来维持基线稳定,不能与梯度脱洗相容。ELSD灵敏度高,基线稳定,与梯度脱洗相容。
随着高聚物和表面活性剂在许多行业中的广泛应用,简单和可靠的分析方法的尤为重要,他们通常是不含有发色团的复合分子。此类化合物不带有适当的发色团和分离是需要采用梯度脱洗意味着不能采用示差和紫外检测器。ELSD检测高聚物和表面活性剂可以保持基线稳定。
在科研、临床和生产的工艺控制上,药物需要分析评估。目前,随着日益增长的加速药品开发的要求,药品工作者需要一种开速的鉴定方法来测定带物的代谢物、杂质、降解物和各种天然产物,许多不含有适当的发色团,限制了紫外检测器的使用。示差比紫外检测器的灵敏度要低,且不能与梯度脱洗相容,而复杂的药品分析常需要梯度脱洗。ELSD的通用检测能力和梯度相容性使得ELSD是药物分析的理想工具。因为ELSD的响应接近于代表产品的质量,所以即使在降解产物和杂质的性质不明确的情况下ELSD的使用为药物杂质分析提供最快速的方法。
结论: 蒸发光散射检测器正日益成为分析碳氢化合物、表面活性剂、聚合物、脂肪酸和氨基酸、油、和其他难检样品的强大工具,多用途的ELSD能检测任何挥发相低于流动相的样品,克服了常见于示差和紫外检测器的缺点。