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第7楼2010/09/16
1、氨基酸分析仪可以分离和检测所有的氨基酸吗?分离氨基酸是离子色谱法原理吗?
是否可以分离所有的氨基酸,这不好说吧,不过氨基酸分析仪有两种柱子,一种可以用于分析水解蛋白的18种氨基酸,另外一种可以分析30多种氨基酸。如果要同时检测很多种氨基酸,那就要看柱子分离性能了,如果只是检测某一种氨基酸,只要峰形OK,两种柱子都可以用。
氨基酸分析仪的柱子是离子色谱法的原理,如果是其他柱前衍生的方法,应该就是C18柱了。
2、氨基酸与反应液在反应柱中反应的原理是什么呢?反应柱里面有填料还是有特殊溶液做催化?这个过程也叫做柱后衍生吧?
氨基酸与水合茚三酮共同加热被氧化分解产生CO2、氨和比氨基酸少一个碳原子的醛,此时茚三酮被还原。在弱酸性溶液中,还原茚三酮与氨及另一分子茚三酮缩合成蓝紫色化合物茚二酮胺(DYDA)DYDA在570nm处有最大吸收。脯氨酸、羟脯氨酸与茚三酮反应生成黄色物质,在440nm处吸收峰最大。除氨基酸以外,如NH2肽类也可与茚三酮反应生成有色物质。
这个过程是柱后衍生,反应柱里是填料吧,应该没有什么特别的催化剂,至于填料是什么也不知道
3、氨基酸分析仪也要专配一个紫外-可见分光光度计,对于DAD检测器有必要使用吗?也即对于检测多个氨基酸,波长不一致情况下,采用DAD可以一次采集到各个波长下的氨基酸吸收度。
不需要DAD,因为只需要两个吸收波长,570nm和440nm
6、氨基酸分析仪与LC的差异点在哪里
现在液相的公司也有氨基酸分析包卖,那天听Waters的介绍说,用他们的分析包在UPLC上检测18种氨基酸只需要10分钟左右,不过成本应该比较高吧。
不过氨基酸分析仪只能用在检测氨基酸上面,应用面比较窄