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【求助】测定奶酪中的游离氨基酸

液相色谱（LC）

  • 大家好！我要测定奶酪中游离氨基酸，用岛津C18的柱子，使用哪种柱前衍生法比较好？刚开始接触，麻烦大家指导一下！具体方法能否发到本人邮箱。迫切需要帮助！

    我现在想用丹磺酰氯衍生氨基酸，流动相如下：
    称取(1•36±0•025g)醋酸钠(三个结晶水)置于800ml烧杯中,加纯水500ml,搅拌至所有结晶溶解后加入90μl三乙胺并混合,在酸度计控制下,用2%醋酸(含量36%)调pH至7•2±0•05,然后加入1•5ml四氢呋喃,并混合均匀,备用。流动相B:称取1•36±0•025g的醋酸钠(三个结晶水)置于800ml烧杯中,加纯水100ml搅拌至溶解。在酸度计控制下,用2%醋酸调pH至7•20±0•05,然后加200ml乙腈和200ml甲醇混合均匀,备用。
    梯度洗脱
    这样选择合适吗？
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    +关注 私聊

  • 有水有渝

    第1楼2010/09/28

    应助达人

    一般用异硫氰酸苯酯为衍生剂，方法常用梯度洗脱，网上有许多相关的文献

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    +关注 私聊

  • naranjo

    第3楼2010/10/01

    OPA和FMOC做柱前衍生也是可以地，我做过植物游离瓜氨酸、丙氨酸、亮氨酸、精氨酸等，效果还可以

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  • 〓猪哥哥〓

    第4楼2010/10/03

    仅供参考：

    0.1M异硫氰酸苯酯 三乙胺/乙腈溶液(1M) 衍生方法: 样品:异硫氰酸苯酯:三乙胺=2:1:1衍生1小时,用正己烷萃取取下层液样品必须为流离氨基酸否则要首先用6M盐酸110度水解24小时. 此方法用于多种氨基酸的分离单一氨基酸应该用比较简单的方法建议不宜用此法。

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