色谱柱填料基质是硅胶,无论如何封端,都会有大量残留的硅羟基,这些硅羟基的pka大概在4~5左右(见过很多中说法,但是多数都在这个范围),所以,为了抑制硅羟基导致的峰形差、拖尾,一般我们使用的流动相首选添加0.1%的磷酸或者是三氟乙酸(pH大概在2.2左右)。
fobhcff(fobhcff) 发表:刚开始接触色谱,要求调节流动相PH值,还以为是必做的流程,相信刚接触的你也是这么认为的,但这种认识是错误的,
1、这样的要求只是为了统一,便于保护柱子。
2、每个色谱柱都有其特定的PH使用范围,不在此范围会影响到柱子的使用寿命,和柱子的稳定性。
3、你调了PH值,必然会用到酸或碱带入新的杂质,得不偿失。
4、如果你用超纯水的话,配出来的流动相一般会保持在某一个范围内,没有必要调。