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【讨论】新买的ZORBAX SB-AQ柱没用几次出现双峰现象

qhhuang

2010/10/12

液相色谱（LC）

最近新买的ZORBAX SB-AQ柱才用一周，光做做一些标准样品和2个稀释的水解样品，就出现双峰（原来一个峰裂分为大-小峰）现象，问题出在哪里？

虽然了解到双峰有很多可能原因，我当时是一个个排除，先是怀疑标准品分解或者互变异构体（确实有）的相互转化，但是重新配置标样后还是存在双峰现象；接着怀疑流动相，降低流动相中缓冲盐的浓度（因为是在提高浓度后出现的），也还是存在。第三，怀疑柱子容量有限，出现过载，降低进样量和进样浓度，还是存在。

怀疑柱子保留了很多目标化合物，但进空白样却未有目标物质信号出现；用大量流动相（缓冲液，还有甲醇）反复冲洗，双峰出现变化，大峰变高、变尖，小峰变矮、接近基线并类似拖尾。

问题还是没有根除，本想反冲保护柱，后来决定先换一个保护柱看看。
结果，问题还真是出在保护柱上（但若说保护柱脏了，可柱压一直保持不变）。
换了保护柱，一切OK了。

但究竟保护柱怎么了？如果只做几个标准样品，保护柱就不行了，那这个方法没法做下去。
那根用过的保护柱有办法再利用吗？
如有高见，请不吝赐教！谢谢！

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有水有渝

第1楼2010/10/12

应助达人

如果确认是保护柱污染了，那说明样品前处理最好要把污染物处理干净一点，还有就是有的样品对柱的要求比较高

0

〓猪哥哥〓

第2楼2010/10/12

是什么品牌的色谱柱？填料是什么？如果有可能更换一个新保护住。

0

jiangwibo

第3楼2010/10/12

如果是新的保护柱,只做几个标准品就挂了的话,那么这方法成本确实太高了.如果是商检的话,建议楼主多收点儿钱.不行的话,就只有优化前处理了,过一下纯化柱了.不过,无形中增长了实验时间,降低了效率了.那还是多收点儿,简单实在.

0

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