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【求助】LUNA氨基柱柱压升高

mcrobby4

2010/10/12

液相色谱（LC）

使用的是菲罗门的LUNA氨基柱，250*4.6的.流动相是乙腈：水=75：25.流速1ml/min
柱子比较新，一直用来测糖类样品。正常时柱压一直维持在9-10mpa左右。
上次，测一种从植物组织里提取的样品（用硫酸亚铁和氢氧化钙沉淀过提取液里的有机物质），pH9左右（柱子说明书说柱子适用pH为2-11），样品经0.22μm微孔滤膜过滤，进样20微升，柱压升高到20mpa。后来稳定后降低到15mpa，用流动相冲洗4小时，柱压未下降。
请问是否是因为样品中含有亚铁离子和钙离子而对柱子产生了影响呢？还是说里面的有机质如蛋白、DNA等对柱子产生的污染？
如果是的话，柱子要怎么处理才好？这种情况下反冲有效果么？
如果反冲，要用什么样的流动相及流速呢（该柱子目前只用过乙腈：水=75：25这一种流动相）？
我每个样品都用0.22μm滤膜过滤了，应该可以排除颗粒物对柱子的污染吧？

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有水有渝

第1楼2010/10/12

应助达人

有机质如蛋白、DNA等对柱子产生的污染的可能性比较大，对于基质复杂的样品，最好还是加保护柱。用20%乙腈，50%乙腈，90%乙腈，反复清洗试试。

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mcrobby4

第2楼2010/10/13

哦，我先试试看。。。。谢谢啦

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