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【求助】FMOC-Cl衍生化试剂问题

ohwey

2010/10/23

液相色谱（LC）

在使用FMOC-Cl分析血浆中colistin药物的时候遇到FMOC-Cl衍生化试剂的问题。
本身使用perkin elmer HPLC系统搭配FL detector，C18 column，mobile phase使用ACN:THF:H2O=87:4:13，流速1ml/min，萤光Ex:260nm Em:315nm。
衍生化试剂FMOC-Cl本身具有萤光且易潮解产生FMOC-OH，当配制FMOC-Cl 100mM溶於ACN内打入HPLC时图谱有许多干扰峰，如图
就自我认知上peak可能有一FMOC-Cl再加上FMOC-OH两者，但结果却有好多peak产生，重复配制数次结果皆相同，这是正常的现象吗？这样的情况不知道有没有办法避免？15分钟前的梯型peak有办法去除掉吗？干扰太多没有办法进行下一步的分析样品。希望能赶快解决单纯将FMOC-Cl打入HPLC却产生许多peak的问题，麻烦给我指导，让我有一絲曙光吧！

10/25
感谢大家的回复，首先在FMOC-Cl方面已购置新的FMOC-Cl(sigma)，并且也有分装至多个样品瓶保存，於秤药时皆拿取少量之样品瓶为优先，起初也是怀疑FMOC-Cl不纯与损耗而购置新的试剂，对於量的比对如下图所示分别为1nM与100pM

先感谢大家费尽心思与时间的解答。请多多指教！还是希望可以赶紧解决

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有水有渝

第1楼2010/10/24

应助达人

FMOC-Cl衍生化试剂是不是加的太多了，减少用量试试，最好做了试剂加入量的对比

0

naranjo

第2楼2010/10/24

配FMOC的时候注意ACN易挥发，并把FMOC分装在多个进样瓶中比较好吧，还有买现成的试剂试试看？

0

老多_小多

第3楼2010/10/24

100mM好像是很大
有水有渝(xky0230699) 发表:FMOC-Cl衍生化试剂是不是加的太多了，减少用量试试，最好做了试剂加入量的对比

0

〓猪哥哥〓

第4楼2010/10/24

FMOC-Cl样品是不是本身就不纯？

0

ohwey

第5楼2010/10/26

不晓得衍生化试剂是不是很容易裂解。

0

第6楼2012/09/23

请问楼主这个问题解决了吗？我最近也遇到这个问题，头大得很！

0

影子706

第7楼2017/09/06

想问下楼主后来是怎么解决这个问题的？我也遇到这样的问题了

0

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