【求助】求帮忙分析一下我的HPLC图

应助达人

检测波长是多少，超纯水都不要进，也就是什么都不要进，直接采集梯度基线看看，如果还是这样，把色谱柱拆下，换上阻尼管再采集梯度基线，以检查是不是系统污染，流动相问题等。

波长是225nm，什么是阻尼管？谢谢！

应助达人

阻尼管就是你有没有多余的不锈钢管路，找一个接上去就行了，实在没有直接接一个双能接头也行。

如果是第一次这样是正常的。如果要走高梯度，一般会高有机相洗一次。如果不进样走的第二次还这样，那很可能是系统污染了，一般是流动相，可能是乙腈或TFA。可能TFA污染了取用工具造成的。用未开封的TFA，用干净的移液管直接移取，洗耳球也可能会污染（里面有液体什么的）。有些未开封的TFA也不好，可能厂家分装的时候用的橡胶或塑料被腐蚀了，最好能用另一批号的。

很可能是流动相受污染了

1、流动相TFA污染
2、进样口污染
3、梯度陡度太大，导致漂移严重

柱子污染了，建议用洗柱方法反向冲洗后再正向冲洗一段时间

请问连续走几针空白图谱还是这样吗？杂质峰有没减弱的趋势？
还有你用的TFA或者ACN是色谱纯还是分析纯？低级别的溶剂里面常常含有一些杂质。从你图谱来看，这个可能性很大

楼主的这个条件很眼熟，是要做氨基酸的么？？我们曾经做过一个实验，是做氨基酸的某个梯度条件，不进样光跑梯度就基线很差，用不同家仪器也做过，现象比较重复，无解。。。。。