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【求助】waters1525—2996 梯度基线波动

樱雪川北冥

2010/11/17

液相色谱（LC）

小弟是第一次做蛋白质和多肽的分离，参考了一个流动相，A:WATER 0.1%TFA ,B:ACN/WATER 80:20 0.1%TFA ，从95:5开始，一直到50:50，效果虽然不太好但基线是没问题的，但从今天开始，平衡柱子时就发现基线开始不稳了，就像是有气泡一样，PURGE也没用，不知是设么原因，求助

注：1.1525的集成脱气机已经坏了，但流动相已经抽过超过了。
2.听说含三氟乙酸的流动相很容易有气泡，是这样吗？
3.本人用的样品是一种抗生素发酵液，里面的成分比较复杂，所以加了一根普通的c18保护柱，不知道会不会把样品中的大分子蛋白质给滤掉，而影响结果
4.另外问一个很弱的问题.....pda检测器的噪音是不是比紫外的要大啊？还有大家平时都把2996的参数设成多少？（empower2 ，我的是英文版....费劲了）最好给个图

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〓猪哥哥〓

第1楼2010/11/17

楼主上传一个图谱吧
pda的检测器相比紫外噪音稍微大点，但是没有显著影响，不影响实验

0

flyaway

第2楼2010/11/18

检测器后加一段反压，试试看

0

flyaway

第3楼2010/11/18

另外问一下楼主，检测波长？

0

樱雪川北冥

第4楼2010/11/18

254是没问题的，但到了210就不行了
flyaway(flyaway) 发表:另外问一下楼主，检测波长？

0

樱雪川北冥

第5楼2010/11/18

另外说明，单独跑一个通道或两个通道跑统一流动相也是没问题的，所以我怀疑是不是混合的问题

0

樱雪川北冥

第6楼2010/11/18

还有一个问题，三氟乙酸和氟乙酸的效果有什么区别啊？

0

Insm_67f06569

第7楼2018/11/28

使用waters1525做多糖含量测定时，出现很有规律的基线，并且进标品后无峰出现，请教这是什么原因呢

0

分
该帖子已被版主-夏天的雪加2积分，加2经验;加分理由:鼓励发帖

dadgoh

第8楼2018/11/28

应助达人

停泵看一下基线能平吗？平了就是流通池有异物或气泡。需要清洗流通池及憋压除气泡。

0

言逊

第9楼2018/11/29

应助达人

这种一般考虑有气泡，才会这么有规律的波动
Insm_67f06569(Insm_67f06569) 发表:使用waters1525做多糖含量测定时，出现很有规律的基线，并且进标品后无峰出现，请教这是什么原因呢

0

夏天的雪

第10楼2018/11/29

应助达人

用的什么检测器

0

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