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【求助】发酵液分离成不同分子量问题?

前处理综合讨论

  • 分离发酵液中不同分子量物质


    我是做豌豆酸浆的发酵的,老板让我先把发酵液分离成不同分子量的两种溶液,一种是大分子量,一种小分子量。我应该用什么来做呢?是超滤还是层析?本人刚做实验属新手。。。。忘大家不吝赐教!!!

    我的分离后的各组分都需要用。用透析袋透析可以吗?

    但是我买的透析袋是常常的一条带子,只有2,3十厘米宽。和“袋子”差距很大啊。谁知道怎么用吗?
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  • dahua1981

    第1楼2010/11/24

    应助达人

    可以考虑过柱子试试
    萃取

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  • tianru的爸爸

    第2楼2010/11/25

    可以用透析袋。

    超滤比层析好。因为超滤处理量大,适合于制备,而层析处理量小,适合于分析。

    超滤与透析要考虑两个的截留分子量是多少。以这个分子量大小来分大、小分子量。

    超滤比透析好,因为超滤可以不增加其它溶液,而透析需要增加其它溶液来接受小分子量溶剂。

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  • tianru的爸爸

    第3楼2010/11/25

    一般的透析袋在使用前的处理:
    1. 把透析袋剪成适当长度(根据你的样品量来决定)的小段。
    2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
    3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
    4. 放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
    5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套。
    6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。

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  • tianru的爸爸

    第4楼2010/11/25

    透析袋使用时:
    一端扎紧(用橡皮筋或线绳扎紧,也可以使用大小合适的专用的透析袋夹夹紧),由另一端灌满水,用手指(记得戴手套)稍加压,检查不漏,方可装入待透析液,通常要留三分之一至一半的空间,以防透析过程中,透析的小分子量较大时,袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时,体积增加50%是正常的。
    为了加快透析速度,除多次更换透析液外,还可使用磁子搅拌。透析的容器要大一些,可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析,可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。

    ——大分子量的在透析袋里面,小分子量的在透析袋外面,再把外面的溶液浓缩就是你的小分子量溶液了。

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