【求助】大家帮帮忙给我分析一下，我的高效液相不出峰是怎么回事

应助达人

这三个东西在你给出的色谱条件下能分离的开吗？方法是标准方法还是自己建立的？

用C18柱做糖么？似乎难分吧，看楼主的图似乎都在死时间出完了。可以尝试换换其他方法，用氨基柱或其他？

通常我们做单糖和聚合度小于10的多糖,都是用的正相色谱氨基柱加上RID的,你用C18柱肯定不可以的.

建议你用氨基柱,4.6*250mm,流动相水:乙晴(25:75,v/v)然后你可以看到很好的效果,另外,RID的灵敏度非常低,你如果要看到低于1000PPM以下的物质有点困难,一般做糖的LoD都在0.5 mg/ml左右(实际上柱浓度).
所以估计你看不到低聚糖的峰,想看到这些峰可以转为HPAEC-PAD方法.

前面的峰难道是溶剂峰吗？是我的东西还没出来？ 我现在就是想即使用这个柱子分不开，但只要是有物质应该就会有峰吧，在图上面应该显示的是一些杂乱的峰，而不是这么干净的。你觉得可能是什么原因造成的呢？

我查了很多资料，人家大多数都用的是氨基柱或是糖柱，但是我导师这边只有反向C18柱子，我就结合资料选择了这样的条件。 即使分不开，也应该会很多杂乱的峰吧？为什么我的峰线都是平的呢？是跑得时间不够还是什么原因呢？

有水有渝(xky0230699) 发表:这三个东西在你给出的色谱条件下能分离的开吗？方法是标准方法还是自己建立的？

第一个峰应该是吧 没分开

谢谢。但是我还想问一下，用C18柱子连物质峰都看不到吗？我的图跑出来是这个样子的，是不是是哪个地方出了问题，除了是柱子的原因外还有其他原因吗？ 我要是不换柱子的话，想看到里面物质的峰要怎么改善一下呢，不一定要分开，只要能看到有几个峰就行了。

你的意思是所有的峰都叠在一起了？