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【求助】用液相测蛋白纯度上样量有什么要求？

pingjiansi

2011/02/16

液相色谱（LC）

我看到的液相检测蛋白纯度的方法，进样量有不少于10ug的，有不少于20ug的，还有不少于30ug的.怎么回事呢？应该根据什么来确定进样量？

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有水有渝

第1楼2011/02/16

应助达人

根据蛋白质的分子量，色谱柱的容量等。

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pingjiansi

第2楼2011/02/16

我补充一下问题：是反相HPLC方法检测蛋白纯度
pingjiansi(pingjiansi) 发表:我看到的液相检测蛋白纯度的方法，进样量有不少于10ug的，有不少于20ug的，还有不少于30ug的.怎么回事呢？应该根据什么来确定进样量？

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pingjiansi

第3楼2011/02/18

看来做蛋白液相的人不多啊？

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有水有渝

第4楼2011/02/19

应助达人

检测的物质不同，色谱条件不同，上样量也就不同。不可能所有的物质都只有一个检测方法，都用相同的浓度，所以进样量有差异是很正常的现在，就像其它物质的检测，一般都要求进20ul，但也没有人要求进的浓度是一样的，有的是0.1mg/mL,有的是0.01mg/mL。
pingjiansi(pingjiansi) 发表:我补充一下问题：是反相HPLC方法检测蛋白纯度

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pingjiansi

第5楼2011/02/19

我的意思不是上样浓度，是上样蛋白的总量应该满足什么要求？
有水有渝(xky0230699) 发表:检测的物质不同，色谱条件不同，上样量也就不同。不可能所有的物质都只有一个检测方法，都用相同的浓度，所以进样量有差异是很正常的现在，就像其它物质的检测，一般都要求进20ul，但也没有人要求进的浓度是一样的，有的是0.1mg/mL,有的是0.01mg/mL。

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有水有渝

第6楼2011/02/19

应助达人

不超出柱容量，系统适应性达到规定要求，达到杂质灵敏度就行。
pingjiansi(pingjiansi) 发表:我的意思不是上样浓度，是上样蛋白的总量应该满足什么要求？

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