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【求助】请教：HPLC 样品检测出峰问题？？

gaofuyyo12

2011/03/14

液相色谱（LC）

新药分析梯度洗脱出峰时间提前至5分钟左右出峰

各位前辈，我最近接到一项新的实验，委托方提供的方法是甲醇：水=10:90，我们的液相色谱是反向色谱，C18柱 250mm*5mm 4.6um。由于该方法出峰时间长，理论塔板数低（三千八至四千左右），我将其方法换为乙腈，梯度洗脱（10%-30%-10%：0min-8min-12min-15min stop），出峰时间提前至5分钟左右，TP一万多，但是出峰前会上升类似于漂移，但出峰完基线在十分钟左右才开始正常漂移，峰不拖尾。请教大家如何解决?由于是新药，我们不知道其化学结构。

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有水有渝

第1楼2011/03/14

应助达人

甲醇：水=10:90时的保留时间是多少，检测波长多少，仅因为柱效改变方法吗，改方法前与改方法后出的峰个数与强度比例是一样的吗？

0

青橙

第2楼2011/03/14

不用梯度就可以出峰啊把出峰时间往后拖，不要使用梯度

0

xiepengfei

第3楼2011/03/15

进来学习，觉得能不用梯度还是不要梯度好，可以调节加大流动相中甲醇的比例，使得出峰时间加快的。

0

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