【求助】流动相的比例变化会影响峰高和峰面积吗？请大家帮帮忙

是的，保留时间变长之后很多偏极性样品的峰会变胖变矮，但是峰面积有什么变化我没有研究过。我还有一个疑惑，楼主是用的反相柱吗？为什么有机相的比例增加反而样品保留时间变长？配置浓度7mg/ml，进样20ul，我想在一般色谱柱上是过载的。

你好，感谢你的回复！
我用的是C18反相柱。保留时间变长后峰变高了，峰面积也因此增加了。
我觉得极性样品在反向条件下应该是有机相比例越高越保留。对吗？
此外，我想弄清楚的问题就是在这个浓度和进样量下一般色谱柱会过载，可是我在用有机相比例低的时候，保留时间短，为什么没有过载现象出现，所以我也没调整浓度。为什么增加有机相比例后，保留时间增加，谱峰才显现出过载现象？所以我想是不是有机相的比例的改变会影响峰高和峰面积？（就是我的谱峰变得又高又胖是不是和改变流动相有关呢）

你是因为出峰早而把有机相的比例提高以延迟出峰才出现峰变得很宽，对于一个偏极性的样品你觉得正常吗，应该这样会出峰更早吧。我想知道到底是什么样的样品，或者它的溶解性是怎么样的