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【求助】F-7000测量荧光量子效率的问题

分子荧光光谱

  • 不知道怎么做固体的荧光量子效率。照说明书做了一下,量子产率不是0就是负数。

    校正的部分先不管了。测量的部分 method部分不知道选 emission还是exctitation,激发波长啊,范围啊,也不知道有什么讲究。

    重点是这么设定后,出来的光谱除了激发光有一个峰,其他荧光峰一个也没有,也不知道是哪里出了问题。只好来求教大家了。

    坛子里搜了搜,资料有一些,基本上手头都有了,只不过是英文的。

    测荧光量子效率的时候要先测一个标准物质,然后再测一个试样,之后导入数据进行计算。 我的问题是用发射光谱还是激发光谱来做测试有什么区别吗?有做过的人能详细写一下步骤就好了。感谢。
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  • ppddppdd

    第1楼2011/05/12

    F-7000没驶过。
    不过固体量子效率和液体不同,差别挺大的,尤其是反射峰那块。

    至于校正吧,大多数只能差不多就那样,高精度测量目前在现成仪器上是不可能实现的。

    我搞过几年固体荧光量子效率的测试分析,国际上大多数测试方法从原理上讲本来就存在很多简化,这种简化在某些波段会引起很大的误差(结果就是测量出来的量子效率为负或者超过1)。

    最简单的方法,找个荧光激发发射峰和你样品类似的,做参比,利用它的量子效率来反推你的量子效率。

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  • ravel

    第2楼2011/05/12

    谢谢您的解答。貌似就是对我的某些物质内量子效率为负数,外量子效率还是正的。不知道这种结果有没有参考价值
    当外量子效率超过0.3的时候,内量子效率就大于1甚至是负的。不明白测量误差为什么会导致测的吸收值为负数。

    ppddppdd(ppddppdd) 发表:F-7000没驶过。
    不过固体量子效率和液体不同,差别挺大的,尤其是反射峰那块。

    至于校正吧,大多数只能差不多就那样,高精度测量目前在现成仪器上是不可能实现的。

    我搞过几年固体荧光量子效率的测试分析,国际上大多数测试方法从原理上讲本来就存在很多简化,这种简化在某些波段会引起很大的误差(结果就是测量出来的量子效率为负)。

    最简单的方法,找个荧光激发发射峰和你样品类似的,做参比,利用它的量子效率来反推你的量子效率。

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  • ravel

    第3楼2011/05/12

    刚刚收到工程师的回复,散射光范围设错了。明天重新计算一下应该就可以了。感谢1楼的热情帮助。

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  • fragr

    第4楼2011/05/14

    粉末材料的量子产率测量(积分球辅助)一般都是采用发射谱来测定激发峰(散射峰),和荧光峰;条件相同或者具有比例计算可能;设定发射波长范围包括从激发波长-10nm到发射波长完毕。

    基础校正很重要。

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  • ravel

    第5楼2011/05/14

    照工程师的做了,结果全部接近0,还是不对啊。不知道您所说的基础校正是什么? 散射校正,无样本校正和有样本校正?之前工程师来过,校正后留下一些校正文件,不知道可否直接使用?

    我的东西发射光谱从550开始到700结束

    用激发波长480nm,范围470-700nm,您看可以么?

    因为是做膜的材料,首先测了一块标准物质的光谱,然后换白板夹我的试样测一个样品的光谱。最后导入这些数据,设定散射光范围和荧光峰范围。
    工程师说散射光范围在激发波长的正负10nm。

    fragr(fragr) 发表: 粉末材料的量子产率测量(积分球辅助)一般都是采用发射谱来测定激发峰(散射峰),和荧光峰;条件相同或者具有比例计算可能;设定发射波长范围包括从激发波长-10nm到发射波长完毕。

    基础校正很重要。

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  • fragr

    第6楼2011/05/16

    所谓测发光效率,首先需要发光光谱。

    需要先期测量是否发光?正常测定条件下,能够观测到足够信号强度?如果没有,当然发光效率是可能为0.

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  • ravel

    第7楼2011/05/16

    我的东西一定发光,而且很强。以至可见光照射下能显出鲜艳的红色,荧光量子效率应该在0.1以上。在那个条件下,普通的发射光谱能做出来,而且比较明显。不过保持同样的条件,换了积分球,峰就不明显了。因为激发光附近的那个峰很高。有必要调狭缝宽度?

    fragr(fragr) 发表:所谓测发光效率,首先需要发光光谱。

    需要先期测量是否发光?正常测定条件下,能够观测到足够信号强度?如果没有,当然发光效率是可能为0.

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  • fragr

    第8楼2011/05/17

    测定过程一定有问题。可以先做发射光谱扫描。

    看来操作说明书你一定要细细阅读了。

    可以在积分球状态下,做光谱扫描看看。

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  • ravel

    第9楼2011/05/17

    您是说,在安装积分球条件下直接装样品做发射光谱?怎么说呢,现有条件,发光峰的高度是40。如果用480nm激发,在480会有一个很高的基频峰出现,大概是4000,可能是因为这个导致测量不准?

    说明说很烦人,有罗丹明, 氧化铝,白板(可能是硫酸钡?,纯白的白片),标准参比物质(白色的片后面加了个盖子的那种),罗丹明是测溶液量子效率的可以不管。后三样东西弄晕了。

    照操作书上是这样的,先把氧化铝装矩形盒测无样品校正,然后加标准参比物质测有样品校正
    然后氧化铝装矩形盒测无样品光谱,然后测戴测物质光谱。

    上述为粉末物质效率的测量,但我的东西是一张膜,说明书上没有的。

    fragr(fragr) 发表:测定过程一定有问题。可以先做发射光谱扫描。

    看来操作说明书你一定要细细阅读了。

    可以在积分球状态下,做光谱扫描看看。

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  • jixf_1114

    第10楼2011/05/19

    测定固体量子效率前,对于仪器有个性能验证及光谱校正的要求,包括:激发、发射波长的准确性,信噪比。激发光谱、发射光谱的校正。及长波长的校正,关于这些可以参照说明书。
    之后在用积分球的情况下测定发射谱,确定最佳激发波长与发射谱范围。然后优化条件,调节狭缝与电压,使得激发光的散射光强度没有超出仪器检测限,而且发射光谱不能太弱了,并选择不同的扫描速度,比较重复光谱,确定最佳扫描速度。
    再然后,才是用氧化铝测定激发光的强度,然后是激发光散射强度与发射光谱。再然后是间接激发的情况,然后是根据公式去计算得到绝对的量子效率。

    步骤比较多,也很繁复。

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