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【求助】HPLC测乙酸标准溶液杂峰问题

液相色谱(LC)

  • 本人刚接触液相,用HPLC测挥发酸,配的乙酸标准溶液浓度为1ml/L,进液相出来的图中杂峰很多,请教各位朋友是哪里出现了问题,不甚感激。乙酸为优级纯,流动相采用甲醇:磷酸盐缓冲溶液=15:85。磷酸盐缓冲溶液浓度为12mM,ph2.1,所用的磷酸及磷酸盐均为优级纯。
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  • jancy134

    第1楼2011/06/01

    2点多分的那2个峰都是些什么峰呀,样品测试中也有2个那样的峰,会跟甲酸的峰无法分离

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  • jancy134

    第2楼2011/06/01


    这个是样品的出峰情况,7.33的是丙酸

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  • kylabs

    第3楼2011/06/01

    分离的效果有问题,丙酸的拖尾太严重了,要先优化好条件在来测。可以参考以下结果和条件:

    1:草酸;2:酒石酸;3:甲酸;4:乙酸;5:叠氮化钠
    6:尿嘧啶;7:丁烯二酸;8:丙酸

    柱子:Cogent Bidentate C18™
    流动相:100% Aqueous (0.05% H3PO4)
    流速:1.0 ml/min

    Catalog No.: 70000-15P-2
    Dimensions: 2.1 x150 mm
    Solvents: A: DI water + 0.1% formic acid
    B: acetonitrile + 0.1% formic acid
    Gradient: 0–0.2 min 95.0% B 0.2–30 min to 50% B
    30–35 min 50%B 35.1 min to 95%B
    Post time: 5 min
    Flow rate: 0.4 mL/min.

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  • jancy134

    第4楼2011/06/02

    谢谢楼上的回复,可是优化条件该从哪方面入手呢?(本人刚接触液相 别笑我) 还有就是solvents里面加0.1%的甲酸是什么目的呢?不是需要测甲酸的量么?

    kylabs(kylabs) 发表:分离的效果有问题,丙酸的拖尾太严重了,要先优化好条件在来测。可以参考以下结果和条件:

    1:草酸;2:酒石酸;3:甲酸;4:乙酸;5:叠氮化钠
    6:尿嘧啶;7:丁烯二酸;8:丙酸

    柱子:Cogent Bidentate C18™
    流动相:100% Aqueous (0.05% H3PO4)
    流速:1.0 ml/min

    Catalog No.: 70000-15P-2
    Dimensions: 2.1 x150 mm
    Solvents: A: DI water + 0.1% formic acid
    B: acetonitrile + 0.1% formic acid
    Gradient: 0–0.2 min 95.0% B 0.2–30 min to 50% B
    30–35 min 50%B 35.1 min to 95%B
    Post time: 5 min
    Flow rate: 0.4 mL/min.

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  • jancy134

    第5楼2011/06/02

    我的4个酸的图如下,其中3.11、3.90、7.34、18.66分别对应的是甲、乙、丙、丁4个酸,但是8.25分时候的那个峰可能会是什么呢,我做的每一个样品在那个时间左右都会出一个峰,是我流动相的问题,还是别的什么问题呢?

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  • 有水有渝

    第6楼2011/06/02

    应助达人

    单独进丙酸标准溶液时的图谱的怎么样的?

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  • jancy134

    第7楼2011/06/02

    单独丙酸的话是这样的

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  • kylabs

    第8楼2011/06/02

    不好意思,条件贴错了,是
    流动相:100% Aqueous (0.05% H3PO4)
    流速:1.0 ml/min

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  • kylabs

    第9楼2011/06/02

    贴错条件了,对不起:

    ColumnCogent Bidentate C18™
    Catalog No.40018-7.5R
    Dimensions75mm x 4.6mm id
    Flow Rate1ml/minute
    Mobile Phase100% Aqueous H3PO4
    0.05% v/v
    DetectionUV 255nm
    jancy134(jancy134) 发表:谢谢楼上的回复,可是优化条件该从哪方面入手呢?(本人刚接触液相 别笑我) 还有就是solvents里面加0.1%的甲酸是什么目的呢?不是需要测甲酸的量么?

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  • 有水有渝

    第10楼2011/06/03

    应助达人

    到底哪个是丙酸峰呢,换一根色谱柱试试

    jancy134(jancy134) 发表:单独丙酸的话是这样的

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