【求助】营养琼脂培养基灭菌有部分后长菌？

应助达人

除了装营养琼脂培养基的瓶子，觉得只是倒培养基，应该不会被菌种污染，所以没有灭菌。一直配营养琼脂培养基的锥形瓶都是这几个瓶子。

那问题应该是在这吧，如果参照以前既往的惯例，应该是混进细菌了所以才会长，微生物因为眼睛无法辨别，所以不能凭感觉，只能严格按操作规程处理。

以前在药厂，培养基都是用120度30分钟灭菌的。

我认为灭菌完后，培养基应放置恒温培养18至24小时后，如果没有细菌生长再放入4℃冰箱中保存备用，如果有菌生长（视菌落多少）则需重新灭菌或重新配制。

由于灭菌时，放置营养琼脂培养基瓶子的位置不同，培养基瓶子中心位置所受的压力和温度有所不同，所以极少数的培养基瓶子灭菌不一定很彻底（有的芽胞还没有死亡），因此才长菌。

厂家说明书上时115℃灭菌30分钟。我也觉得假如配制过程中被污染，那么115℃灭菌30分钟决定是杀死不了芽胞的，芽胞是在121℃，30分钟才能杀死。
配置到放入灭菌锅过程是花费的时间是半个小时左右，应该不会长菌那么快吧？
密封的锥形瓶里的培养基只是表面长菌，是需氧菌吧？是不是说明锥形瓶没有密封好呢？

谢谢啊!你说的种可能性是有的，但是几率很小吧！当时灭菌的培养基确实有点多，是重叠着放的。

115℃灭菌30分钟
第一次见到营养琼脂灭菌只用115℃的

最后拿剩下的两瓶未使用的培养基直接培养，其中一瓶长菌了，

楼主的意思是空白培养有问题吗？
会不会是冰箱温度不对？

应助达人

杀死芽孢一般都是120度120分钟才行。

用的培养基是上海微生物科技有限公司的，瓶签上是115℃灭菌30分钟，一直没有过异常，就这次发现异常