一次完整的流感嗜血杆菌分离鉴定

流感嗜血杆菌俗称流感杆菌，是嗜血杆菌属中对人有致病性的常见细菌。该菌是波兰细菌学家于1892年流感世界大流行时，首先从流感患者鼻咽部分分离到的，当时认为该菌是流感的病原体，为此而得名。直至流感病毒分离成功，才确定了流感的真正病原，但流感嗜血杆菌这一错名却仍沿用至今，只是此菌是流感时继发感染的常见细菌。[1]

实验部分:
1. 痰标本涂玻璃载物片,观察每个低倍视野计数白细胞(WBC)和鳞状上皮细胞(SC)，结果为WBC<25/低倍视野，SC<10个/低倍视野。[2]
2. 标本分装3份，一份做实验，一份上送，一份保存备用。
3. 消化痰标本，标本加5ml生理盐水，加入5ml 1%的PH7.6胰蛋白酶，消化90min。后接种巧克力平板。经5%CO2孵箱，37℃培养18h－24h。
4. 挑取湿润、扁平、灰白色的菌落进行革兰染色镜检，可见革兰阴性小杆菌。
5. 将在巧克力平板上纯培养的细菌用0.5ml胰酶大豆肉汤配制菌悬液，用无菌棉签将细菌悬液涂布接种到胰酶大豆平板上，待平板干燥后，将X+V因子、X因子、V因子纸片贴于平板上，置5% CO2孵箱过夜。结果为只在X+V因子纸片周围生长，X因子、V因子纸片周围不生长菌落。
6. 生化鉴定，利用VITEKⅡ做生化实验，鉴定结果为流感嗜血杆菌。
7. 血清分型实验，采用玻片凝集法，分别用流感嗜血柑菌“a－f”多价血清进行血清分型，分型结果为c、e。
结果：鉴定出细菌为c群流感嗜血杆菌和e群流感嗜血杆菌。
讨论：本鉴定试验的整个过程所使用的所有培养基、鉴定用试剂、试条都必须在使用有效期内，并且经过实验室质量检查通过的。整个实验过程都是在质控之内，所以实验比较科学，结果可靠。

巧克力平板上 的菌落形态



VITEKⅡ 生化实验 结果



V+X因子纸片 实验



流感嗜血杆菌A-F诊断血清试剂

结论：流感嗜血杆菌在巧克力平板上生长的菌落为无色透明、半透明或灰白色、湿润、露滴状。V+X因子纸片周围有菌落生长，而在V因子和X因子纸片周围无菌落生长。

参考文献:

[1]李凡 编 《医学微生物学》 人民卫生出版社

[2]徐建国 编《现场细菌学》 科学出版社

应助达人

很少做微生物的实验，感觉与理化实验相比，还是有很多的不同的

微生物一般做 定性 而理化 一般 主要是做 定量了。

写的很好啊，

这玩意虽然不懂，但是条理听清晰的

记得 每个月 都来 发表下 意见。呵呵。

应助达人

这个实验不用任何仪器吗？

全自动微生物鉴定 系统 忘了发上来。