【讨论】（非）食用添加剂检测活动征集：方便面中邻苯二甲酸酯的测定～～5楼有精彩

一般PP和PE里不加增塑剂的吧

看到博纳艾杰尔出了相关前处理的产品：
http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110613/3361023/

个人还未尝试，筹备中。如果有人试过能先发点资料上来吗？谢谢！

应助达人

方便面中面饼、酱包等属于油脂，前处理较麻烦点，请问除GPC外，用什么方法还可以呢？

朱老师有没有测？分享分享您的检测过程吧

不同基质食品中邻苯二甲酸酯的测定

1.水性样品

此类样品包括瓶装纯净水、矿泉水，茶、果汁和功能饮料等；某些可水溶解的固体样品。可以先制成水溶液，然后全部作为待处理液，如无脂糖果。推荐前处理柱为Cleanert DEHP （500mg/6mL）。

样品处理：取10mL样品，进行固相萃取富集处理

固相萃取方法：

活化：5mL甲醇、5mL水

上样：10mL水性样品

淋洗：5mL5%甲醇水，真空抽干20min。

洗脱：5mL甲醇

检测：将洗脱液用氮气吹干后，以1mL甲醇定容，然后用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p]液相色谱法检测。

说明：此法多适用于配套液相色谱检测，当样品中邻苯二甲酸酯类的含量较低时，需要采用固相萃取富集才能检测的情况。

一般来说，对于此类样品，可以采用正己烷液液萃取的办法，用GC/MS（灵敏度较高）直接检测。

2.低脂液体样品

此类样品包含液态奶制品、果酱、糖浆等。推荐前处理产品为Cleanert MAS-PAE管。

样品处理：向玻璃离心管中加入2mL样品，然后加入4mL乙腈：甲基叔丁基谜（9:1，V/V），将离心管涡旋2min，最后加入Cleanert MAS-PAE填料，再将离心管涡旋振荡2min后，以4000rpm的转速离心5min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。

检测：GC/MS检测。

3.低脂固体食品

此类样品包括奶粉、饼干、糕点、果冻、奶糖等，推荐产品为Cleanert MAS-PAE管。

样品处理：取1g已制成粉末状的样品，2mL水，加入到Cleanert MAS-PAE离心管中，然后加入4mL乙腈：甲基叔丁基谜（9:1，V/V），将离心管涡旋2min，最后加入Cleanert MAS-PAE填料，再将离心管涡旋振荡2min后，以4000rpm的转速离心5min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。

检测：GC/MS检测。

4.高脂样品

此类样品包括植物油脂、动物油脂、奶酪、动物组织性食品等，推荐前处理柱为Cleanert PAE。

4.1 动植物油脂样品的处理

取0.2g样品，用1mL正己烷溶解，作为待净化液。

固相萃取方法：

活化：5mL正己烷

上样：全部待净化液

淋洗：7mL正己烷

洗脱：3mL乙酸乙酯：正己烷（50:50，v/v），洗脱2次，合并洗脱液。

40℃氮吹至近干（目视只剩少许粘稠油状物体），加入1mL乙腈反萃取，涡旋振荡

3min，以4000rpm转速，离心5min，轻轻地将上清液倒入2mL玻璃样品瓶中，作为待

检液。

检测：GC/MS检测。

4.2其他样品的处理

取样品0.5g，以5mL正己烷于密封玻璃瓶中超声提取，然后以4000rpm转速，离心5min，取上清液作为待净化液。若样品中含有水，视情况加入适量无水硫酸钠后，再进行上述操作。

固相萃取方法：

活化：5mL正己烷

上样：全部待净化液

淋洗：3mL正己烷

洗脱：3mL乙酸乙酯：正己烷（50:50，v/v），洗脱2次，合并洗脱液。

40℃氮吹至近干（目视只剩少许粘稠油状物体），加入1mL乙腈反萃取，涡旋振荡

3min，以4000rpm转速，离心5min，轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中，作为待检液。

检测：GC/MS检测。

5.复杂样品

此类样品多为油水混合态，同时添加有多种风味物质，成分比较复杂，包括方便面调味包，酱油、醋、用来调味的其它酱汁等。根据样品中的脂肪含量，对于高脂样品推荐前处理柱为Cleanert PAE-C柱，对于低脂样品推荐使用Cleanert MAS-PAEc管。

5.1 以Cleanert PAE-C柱进行样品处理，以方便面调味包为例：

取0.5g样品，加入5mL正己烷，涡旋振荡3min后，再加入500mg无水硫酸钠，涡旋振荡3min后，以4000rpm转速，离心5min，取全部上清液作为待净化液。

固相萃取方法：

活化：5mL正己烷

上样：全部待净化液

淋洗：3mL正己烷

洗脱：3mL乙酸乙酯：正己烷：甲苯（50:40:10，v/v），洗脱2次，合并洗脱液。

40℃氮吹至近干（目视只剩少许粘稠油状物体），加入1mL乙腈反萃取，涡旋振荡

3min，以4000rpm转速，离心5min，轻轻地将上清液倒入2mL样品瓶中，作为待检液。

检测：GC/MS检测。

5.2 以Cleanert MAS-PAEc管进行样品前处理，以酱油为例

样品处理：向Cleanert MAS-PAE离心管中加入2mL样品，然后加入4mL乙腈：甲苯（9:1，V/V），将离心管涡旋2min，最后加入Cleanert MAS-PAEc填料，再将离心管涡旋振荡2min后，以4000rpm的转速离心5min，取上清液，以邻苯二甲酸酯检测专用针式过滤器过滤后，待检。

检测：GC/MS检测。

附件一：

高效液相色谱法检测15种邻苯二甲酸酯的含量

色谱柱：Agela Venusil XBP C18-L ，4.6×250mm，5µm，150Å（订货号：VX952505-L）

流动相：A：水，B：甲醇：乙腈=50:50

Time/min	A/%	B/%
0	40	60
2	50	50
10	60	40
12	70	30
20	70	30
31	100	0
40	100	0
40.01	40	60

流 速：1.0 mL/min

波 长：242 nm

进样量：5 µL（100ppm），50µL（10ppm）

样 品：15种邻苯二甲酸酯

浓 度：100 ppm（正己烷），10 ppm（40%流动相A）

溶 剂：正己烷 /40%流动相A

柱 温：30℃

图1 邻苯二甲酸酯标准品HPLC色谱图(样品浓度：10ppm)

（邻苯二甲酸二甲酯DMP，邻苯二甲酸二乙酯DEP，邻苯二甲酸二正丁酯DBP，邻苯二甲酸二辛酯DEHP，邻苯二甲酸丁苄酯BBP，邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯DEHP，邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯DMEP，邻苯二甲酸二丁氧基乙酯DBEP，邻苯二甲酸二戊酯DPP，邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯BMPP，邻苯二甲酸二乙氧基乙基酯DEEP，邻苯二甲酸二环己酯DCHP，邻苯二甲酸二异丁酯DIBP，邻苯二甲酸二己酯DNP，邻苯二甲酸二壬酯DINP）

结论：Agela Venusil XBP C18-L色谱柱能够较好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，分离度较好，完全满足LC检测15种邻苯二甲酸酯类物质的含量。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。

附件二

气质联用法检测15种邻苯二甲酸酯

仪器：Agilent 7890/5975 GC/MS

色谱条件：

色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm

进样口：250℃，不分流进样

程序升温：50℃（1min）20℃/min 220℃（1min）5℃/min 280℃（4min）

进样量：1μL

流速：1 mL/min

质谱条件：

接口温度：280℃

电离方式：EI

电离能量：70eV

溶剂延迟：7min

监测方式：SIM模式，监测离子见下表

序号	保留时间/min	中文名称	英文缩写	SIM离子
1	8.265	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	163、77
2	9.135	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	149、177
3	10.888	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	149、223
4	11.637	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	149、223
5	11.979	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	59、149、193
6	12.72	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	149、251
7	13.044	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	45、72
8	13.41	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	149、237
9	15.552	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	104、149、76
10	15.694	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	149、91
11	17.153	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	149、223
12	17.81	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	149、167
13	18.056	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	149、167
14	20.444	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	149、279
15	22.98	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	57、149、71

结论：Agela DA-5ms气相色谱柱能够很好的分离15种邻苯二甲酸酯类物质，完全满足15种邻苯二甲酸酯类物质的几十ppb级含量的定量测定。由于条件所限，笔者手头上只有15种邻苯二甲酸酯物质，所做实验，供大家参考。

附件三

牛奶中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率

按正文第2项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表1、某种牛奶中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为50μg/L)的回收率结果列表

序号	保留时间/min	中文名称	英文缩写	回收率
1	8.337	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	87.82%
2	9.214	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	72.31%
3	10.996	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	81.97%
4	11.759	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	77.33%
5	12.11	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	83.87%
6	12.864	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	83.83%
7	13.201	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	109.08%
8	13.576	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	86.36%
9	15.757	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	84.67%
10	15.923	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	98.33%
11	17.377	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	101.30%
12	18.041	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	92.47%
13	18.28	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	132.32%
14	20.718	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	89.73%
15	23.303	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	70.10%

某植物油中15种邻苯二甲酸酯的添加回收率

按正文第4.1项方法进行某种牛奶的添加回收率实验，得到的数据如下：表2、某植物油中添加15种邻苯二甲酸酯(在样品中的浓度为500μg/L)的回收率结果列表

序号	保留时间/min	中文名称	英文缩写	回收率
1	8.337	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	149.97%
2	9.214	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	93.49%
3	10.996	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	125.70%
4	11.759	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	136.89%
5	12.11	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	90.84%
6	12.864	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	82.29%
7	13.201	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	106.38%
8	13.576	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	88.14%
9	15.757	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	75.32%
10	15.923	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	89.56%
11	17.377	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	105.05%
12	18.041	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	72.94%
13	18.28	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	124.27%
14	20.718	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	78.19%
15	23.303	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	75.27%