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【求助】磷酸盐缓冲溶液基线不稳

液相色谱(LC)

  • 本人在用磷酸盐缓冲溶液+甲醇做液相,前几天走基线时候,大约20多分钟时候就可以走平了。今天做的时候,一开始再-250mv就一直保持很平,大约走了20分钟左右我就进样,但是出来的基线是往下飘的很厉害的那种,我就退出继续让他走基线,但是怎么走也走不平了,在走了120分钟时候我换成超纯水+甲醇,走了1个多小时了,还是不能平下来,请问高手到底是哪里出了问题,在线等,谢谢大家了!
    我用的磷酸盐缓冲溶液是12nM ph=1.9的 水相:甲醇=90:10
    基线图如下
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  • 挣点钱

    第1楼2011/06/18

    你的实验室温度是恒定的吗?柱压和你开始用的时候有很大差距吗?
    貌似你pH还是比较低的啊,主要原因可能还是没有平衡好吧。
    你可以回想一下,这次实验和以前几次的主要差别在什么地方,这样可能有利于你去发现问题。

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  • 有水有渝

    第2楼2011/06/18

    应助达人

    压力稳定吗?如果压力稳定,没有漏液,灯能量正常,那么可能就是色谱柱污染了或流动相污染,建议清洗后重新平衡。

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  • jancy134

    第3楼2011/06/18

    嗯 温度和柱压都是稳定的,唯一的区别是磷酸盐缓冲溶液是前天配的 放在冰箱里保存的。

    huxiaokang(huxiaokang) 发表:你的实验室温度是恒定的吗?柱压和你开始用的时候有很大差距吗?
    貌似你pH还是比较低的啊,主要原因可能还是没有平衡好吧。
    你可以回想一下,这次实验和以前几次的主要差别在什么地方,这样可能有利于你去发现问题。

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  • jancy134

    第4楼2011/06/18

    嗯 可能是柱子或者流动相污染了,我去清洗一下试试,谢谢!!!

    有水有渝(xky0230699) 发表:压力稳定吗?如果压力稳定,没有漏液,灯能量正常,那么可能就是色谱柱污染了或流动相污染,建议清洗后重新平衡。

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  • 依旧

    第5楼2011/06/18

    流动相污染的可定性大点,先用纯甲醇冲洗,再重新配流动相试试

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  • jancy134

    第6楼2011/06/19

    是流动相的问题,我重新配过了, 今天在走就很平了, 不知道是流动相受污染了还是ph得问题,昨天ph调到1.9,今天调到2.0就没有事情了

    依旧(17284539) 发表:流动相污染的可定性大点,先用纯甲醇冲洗,再重新配流动相试试

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  • zhetengwang

    第7楼2011/06/19

    PH1.9你也改试啊?

    我们通常比较保守,不低于3。

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  • jancy134

    第8楼2011/06/19

    呵呵 柱子说明书上说最小可以0.8的,为防止甲酸电离,就把ph调低了

    zhetengwang(zhetengwang) 发表:PH1.9你也改试啊?

    我们通常比较保守,不低于3。

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  • 挣点钱

    第9楼2011/06/21

    那很可能是pH导致的。
    偏酸的色谱柱就是为偏酸的化合物开发的,可能用这类色谱柱也就是用它的偏酸的特性了。

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  • yukepotato

    第10楼2011/06/21

    没试过这么酸的流动相,一般都是2-8吧!

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