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求助!柱子是不是OVER了???

液相色谱(LC)

  • 本人使用的是Nucleodur色谱柱,用了不到二十次.
    今天做了一个中成药的含量检测,流动相为乙腈:0.1%磷酸,压力为12.0-12.2,做出来的峰还是蛮可以的,没出现什么异常现象.
    做完后,没冲洗柱子就直接换上甲醇:水(30:70)的流动相,压力为17.2,继续进行另外一个中药材的含测,结果进了第一针对照品,只出了一两个很小的杂峰,后面再进对照品和样品,均不见出峰,基线一直走得很平,这到底是怎么回事
    流动相肯定是没问题的,而且这个药材我以前也做过,没什么问题,我第一次碰上这个不出峰问题,难道是因为我之前做完了没洗柱子,还是因为压力太大柱子承受不起,还是因为这两种流动相对柱子造成了伤害?
    希望各位前辈能给点指示,要是柱子真的完了那就惨了~~~~~


    谢谢各位前辈的指点,我已经用甲醇冲洗过柱子了,做别的样品都没什么问题,已经排除了柱子存在的问题。

    可唯独做那一项中药材(丹参药材,对照品为丹参酮ⅡA ,流动相:甲醇-水:25-75;压力17-18MPA)的含量一直做不出来,每次进针都只出一个小小的杂峰,到后面就一直不出峰,等了两个小时就是一条平平的基线。

    如果说是检测器采集不到信号,或者样品没有进入到色谱系统中那为什么又可以做得出别的品种呢??
    到现在我已经做了三次了,还是没能找出问题,希望各位前辈能帮帮忙!!!!!
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  • 天地任逍遥

    第1楼2006/02/17

    把柱子再洗洗看,不一定就是柱子的问题,检查一下仪器,有没有其它的故障?

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  • 妮飘

    第2楼2006/02/17

    先用水洗15分钟左右,再用甲醇清洗至少半个小时以后再进样。如果柱子压力太大,超过设定值,仪器会自动停止的。

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  • 天地任逍遥

    第3楼2006/02/17

    柱子清洗后仍然出现这种情况,换一根柱子试试,还不行的话就排除柱子的故障了,很可能是仪器的其它设置有问题,再不就是仪器有故障了.解决的办法就是先易后难逐级排除,实在不行就找厂家.

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  • hplc0729

    第4楼2006/02/18

    会不会根本就没进样?检查一下进样系统吧。

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  • xm

    第5楼2006/02/18

    酸或是盐溶液作流动相以后柱子最好是用水冲洗后再进行别的试验。用水慢慢冲洗试试吧。估计可以冲洗好。

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  • shaweinan

    第6楼2006/02/18

    流动相乙腈:0.1%磷酸的比例是多少?液相色谱在做完一种样品再做另一种样品更换流动相时,溶液的极性不能相差太大,如果比较大时应该采用过渡的方式。再有就是中成药属于“脏”样品,不知你在进样前是否过滤,如果没有过滤就很容易造成柱子的柱头堵塞,形成高的柱压。压力17.2的单位是MPa吗?如果是的话好象还不是特别高,重新冲洗柱子,然后再用流动相进行平衡,再做一次看结果如何,我觉得不应有太大问题。记住更换流动相时如果溶液的性质相差较大的话,一定要进行过渡!

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  • 平凡人

    第7楼2006/02/20

    先洗洗柱子,再检查一下仪器。估计柱子不回报废。

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  • vipvisitor

    第8楼2006/02/20

    先清洗柱子再说吧!
    怎么可能报废啊!

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  • 令狐冲

    第9楼2006/02/20

    先洗洗柱子,再检查一下仪器。估计柱子不回报废
    同意

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  • tkom123

    第10楼2006/02/21

    首先你检查一下工作站软件的设置及具体使用者的操作方法,如果这个都确定没有问题的话,看一下第2次进样的时候柱子是否有压力,如果压力正常的话应该没有什么大问题,要是没有压力或压力不稳的话检查一下管路接头有无泄露,柱子的话重新在平衡一下,应该问题不大

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