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pH5.5-6.5的磷酸缓冲液对反相C18色谱柱的损害问题

液相色谱(LC)

  • 实验需要测定ATP(腺苷三磷酸)和ADP(腺苷二磷酸)的含量,方法是参考99年分析测试学报的一篇文章的方法,具体就是用pH6.25的磷酸缓冲液作为流动相分离ATP和ADP,但今天下午听卖柱子的说磷酸缓冲液对反相C18色谱柱的损害,会迅速降低柱效果,需要购买水基柱

    不知道是不是这样的?

    谢谢,请不吝赐教!
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  • 有水有渝

    第1楼2011/08/31

    应助达人

    用纯水相用反相色谱柱的流动相确实比较伤色谱柱,楼主看看还有没有其它方法。

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  • 耐士科技

    第2楼2011/08/31

    100%水相到100%有机相都可用的C18柱

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  • 知足常乐!

    第3楼2011/09/01

    纯水相对色谱柱的伤害是可逆的

    建议还是选用纯水相的C18色谱柱,以免色谱柱发生相塌陷,检测出现紊乱,耽误工作

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  • liufeilzu

    第4楼2011/09/01

    卖柱子的说什么损害不?具体表现?我的实际经验是哪怕混合有机相,用磷酸盐会造成柱子分离度下降,峰形下降,用后要冲洗很久,我还以为自己的盐浓度高

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  • dahua1981

    第5楼2011/09/01

    应助达人

    有一定的道理

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  • nmgxd

    第6楼2011/09/01

    我之前用pH5.5的磷酸缓冲液做过实验,用的就是C18的柱子,磷酸缓冲液对柱子的损害确实蛮大的,即使你实验后及时冲洗柱子。后来我在柱子前面加了一根C18预柱,柱效的下降有明显改观,但是用后的冲洗还是必不可少的。

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  • xiuwei001

    第7楼2011/09/01

    谢谢各位

    看来要买水性柱子了

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  • fony

    第8楼2011/09/01

    http://www.kromasil.com/application_guide/view.php?app=g0042

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  • fony

    第9楼2011/09/01

    上面链接是分离的谱图你可以参考一下

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