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(跪求助)紫外分光光度法测定未知物(双波长等吸收点法)

紫外可见分光光度计(UV)

  • 紫外分光光度法测定未知物



    1.仪器

    1.1紫外分光光度计(TU-1810型);配石英吸收池(1cm4

    1.2容量瓶(50mL):10个;容量瓶(100mL1

    1.3吸量管(12510mL):各1

    1.4移液管(152025mL):各1

    2.试剂

    2.1标准储备液溶液:水杨酸、邻二氮菲、苯酚、三氯苯酚分别配成0.100 mg/mL的标准溶液。

    2.3标准工作溶液:其中待测组分浓度为1mg/mL

    2.2未知液:其中含有给出的四种物质中的两种。

    3.实验操作

    3.1吸收池配套性检查

    石英吸收池装蒸馏水,以一只吸收池为参比,在测定波长下调节透射比为100%,测定其余吸收池的透射比,其偏差应不大于0.5%,可配成一套使用。

    3.2未知物的定性分析

    现场提供被测组分和干扰组分的吸收曲线的标准谱图。

    选手将四种标准储备溶液均稀释成10.0ug/mL的试液。以蒸馏水为参比,于波长200~350nm范围内扫描四种溶液,绘制吸收曲线,根据所得到的吸收曲线对照标准谱图,确定被测组分和干扰组分的名称。

    3.3确定测定主波长和基线波长

    在已知被测组分和干扰组分的名称后,用前面配制的四种溶液中相应的溶液,确定测定主波长和基线波长。

    3.4 采用双波长等吸收点法测定未知液含量(什么叫双波长等吸收点法,怎么做我不懂)

    3.4.1预测定

    分别吸取1.00mL标准工作溶液和未知液定容为50mL,在主波长和基线波长下测定吸光度,由差值吸光度确定正式测定时候应该吸取的未知液和标准溶液体积。(怎么选主波长和基线波长)

    3.4.2配制标准系列溶液

    吸取一定体积(由预实验确定)标准工作溶液定容为100mL,再分别准确移取1.002.004.006.008.0010.00mL上述溶液,在50mL容量瓶中定容。

    3.4.3配制未知溶液

    选手自定未知液的稀释倍数,并配制待测溶液,平行3份。

    3.4.4吸光度测定

    采用“双波长法”测定标准系列溶液和未知溶液的吸光度,由工作站直接读出未知溶液的浓度。

    4、结果计算

    根据未知液的稀释倍数,可求出原始样品溶液的浓度。
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  • wccd

    第1楼2011/09/15

    应助达人

    推荐方法

    1. 维生素C含量的测定:准确吸取1mg/mL的维生素C标准储备液10mL,在100mL容量瓶中定容(此溶液的浓度为100ug/mL)。再分别准确移取0、1、2、4、6、8、10mL上述溶液,在50mL容量瓶中定容(浓度分别为0、2、4、8、12、16、20ug/mL)。准确移取10mL维生素C未知液,在50mL容量瓶中定容,于最大吸收波长处分别测定以上溶液的吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。从标准曲线上查得未知液的浓度。

    2. 苯甲酸含量的测定:准确吸取1mg/mL的苯甲酸标准储备液10mL,在100mL容量瓶中定容(此溶液的浓度为100ug/mL)。再分别准确移取0、1、2、4、6、8、10mL上述溶液,在100mL容量瓶中定容(浓度分别为0、1、2、4、6、8、10ug/mL)。准确移取10mL苯甲酸未知液,在100mL容量瓶中定容,于最大吸收波长处分别测定以上溶液的吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。从标准曲线上查得未知液的浓度。

    3. 糖精钠含量的测定:准确吸取1mg/mL的糖精钠标准储备液10mL,在100mL容量瓶中定容(此溶液的浓度为100ug/mL)。再分别准确移取0、1、2、4、6、8、10mL上述溶液,在50mL容量瓶中定容(浓度分别为0、2、4、8、12、16、20ug/mL)。准确移取10mL糖精钠未知液,在50mL容量瓶中定容,于最大吸收波长处分别测定以上溶液的吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。从标准曲线上查得未知液的浓度。

    4. 水杨酸含量的测定:准确吸取1mg/mL的水杨酸标准储备液10mL,在100mL容量瓶中定容(此溶液的浓度为100ug/mL)。再分别准确移取0、1、2、4、6、8、10mL上述溶液,在50mL容量瓶中定容(浓度分别为0、2、4、8、12、16、20ug/mL)。准确移取10mL水杨酸未知液,在50mL容量瓶中定容,于最大吸收波长处分别测定以上溶液的吸光度。然后以浓度为横坐标,以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。从标准曲线上查得未知液的浓度。

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  • happyalife

    第2楼2011/09/15

    发到这个板块不合适吧,有专门的紫外板块啊,里面的tutm老师很有名的,你可以问问他

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  • mengzhaocheng

    第4楼2011/09/15

    应助达人

    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110820/3475686/
    我的这个帖子里面有一个关于双波长法的图示,可能会好理解一些。

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  • tutm

    第5楼2011/09/15

    哦,你写的那个双波长法是用联立方程组计算两个组分的浓度,与楼主的双波长等吸收点法好像是有差异的,记得我与你在站短中提起过的。

    mengzhaocheng(mengzhaocheng) 发表:http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110820/3475686/
    我的这个帖子里面有一个关于双波长法的图示,可能会好理解一些。

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  • shwboy

    第6楼2011/09/16

    不懂不懂。。怎没人做过呢急啊???

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  • 祥子

    第7楼2011/09/19

    楼主,给你个文章,看附件。

    你的基线波长就是里面提到的参比波长。

    这个问题,在你得“那位来说说紫外分光光度计等吸收点法 ?本人刚接触不懂”已经解答的很详细了吧。
    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110612/3359287/

    就是本帖子,大家的回复,好好看看也差不多吧。

    如果再不懂,还是问问zlhuang0132老师吧。

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  • 夕阳

    第8楼2011/09/20

    应助达人

    还有另外的紫外版块吗?

    happyalife(happyalife) 发表:发到这个板块不合适吧,有专门的紫外板块啊,里面的tutm老师很有名的,你可以问问他

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  • zqq20061345

    第9楼2011/10/22

    求救,那位大侠有相关双波长紫外分光光度计的资料呀。求做法。。。

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  • xiaowang268

    第10楼2011/11/02

    学习了,谢谢

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