液相色谱(LC)
附件:
xizhi
第1楼2011/09/30
建议参考http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20080425/1234966/
peterhello
第2楼2011/09/30
具体色谱条件和柱子型号?
liufeilzu
第3楼2011/09/30
从你图看到峰在逐渐展宽,不知道是不是溶剂效应,看看一篇溶剂效应的帖子http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20110924/3551310/我仔细看了一下图,又不像溶剂效应很像柱子塌陷了,可是你是新柱子啊?能把溶剂和色谱条件说清楚一点不?
feng861024
第4楼2011/09/30
三氟乙酸作为多肽常用的离子选择性试剂,0.1%为最常用的浓度,可以提高分离效率,提高柱效。但是这个试剂是极易挥发的试剂,请注意密封保存,浓度低的时候峰型变宽拖尾是很正常的。注意现配现用。
julychris
第5楼2011/09/30
有机相:乙腈,水相:0.1%三氟醋酸,乙腈从10%走到75%,样品用乙腈:水=50:50溶解的我的柱子是waters symmetry
第6楼2011/09/30
其实我总共做过三次这个实验,第一次的时候采用新柱,只有第一针峰型好,后来五六针峰型都跟第二个图相似,第二次大概隔了一两天做的实验,峰型也和第二个图相似,后来隔了15天左右在做,就成第三张图的样子了,柱子几乎没有做过其他样品,而且我的样品也很干净。
第7楼2011/09/30
就是考虑到挥发性的问题,三氟醋酸我每次都是现配现用的
第8楼2011/09/30
第一次连续做就出现了第二种情况?你的色谱图第二个就开始出现了峰增宽峰高下降,不是柱子出问题就是溶剂效应。把色谱系统清洗一遍,各个接头包括进样器检查一遍,连接好。如果不是溶剂和柱子,感觉是色谱系统流路没连接好,尤其是柱头有附加的死体积。你用预柱了没有?
第9楼2011/09/30
柱子还是接好的我感觉,因为是waters的柱子,接头处比较深,如果接不好应该还是比较容易发现的。另外我没有用预柱,因为样品很纯,而且色谱条件也比较常规。我没有考察过用50%乙腈作为溶剂是否合适,要不我再考察一下?
第10楼2011/09/30
溶剂调整吧,最好和起始流动相一样,看看问题能不能解觉
品牌合作伙伴
丹纳赫苏州基地 打工人的梦想
执行举报