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关于液相梯度洗脱的问题

rqwzq

2011/11/02

液相色谱（LC）

各位老师，以下的方法是我公司生产的一个品种的检测方法：
梯度洗脱　流动相A 　精密称取磷酸氢二钾0.87g，磷酸二氢钾0.41g，用水溶解后加乙腈125ml，用水稀释至1000ml，pH值为7.5。
流动相B　水－乙腈－磷酸(499:499:2)。
时间(min)　流动相A(％)　　流动相B(％)　　流速(ml/min)
0～13　　 100　　　0　　　1.2
13～28　　 0　 100　　　1.5
28～38　　 100　　　0　　　1.2

像这种情况13分钟后是不是直接转去流动相B不需要过渡，而28分钟也是直接转去流动相A，但这种直接转换的方法不会对柱子产生影响吗，因为流动相A中含有盐，而流动相B中含有乙腈量比较多，就这样直接转换过去在柱子内应该会有盐析出吧。请各位老师指教一下。

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1818

第1楼2011/11/02

最好先慢慢降低比例，以免有盐析出。。。。。

0

liufeilzu

第2楼2011/11/02

药典的方法吧。一般药典梯度都这风格，流动相复杂，梯度很悬。可以更改试试

0

挣点钱

第3楼2011/11/02

梯度转换可以稍微过度一下，比如用2min，这样系统稳定性也会好点。尤其是15cm的色谱柱，甚至更长的。

0

tangtang

第4楼2011/11/03

这个梯度流速也程序变化吗？

0

rqwzq

第5楼2011/11/03

我就是怕有盐析出,现在也是将直接转换改为了5min转换，对检测结果没影响，但就是怕说乱改方法。

0

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