Waters 600E-2487 高效液相色谱系统操作规程

5.4. 进样
5.4.1. 在QuickSet窗口内左下部选〈Single〉标签，在Sample Name档内填写试样名称；在Function档内选择试样类型（标准选“Inject Standards”；样品选“Inject Samples”）；在Method Set档内选择所需的方法组；在Injection Volume档内输入进样体积；在Run Time档内输入记录时间。
5.4.2. 用针头滤器过滤试样溶液（注射液可不必过滤），用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取适量。
5.4.2.1. 如按部分装液法，用微量注射器定容进样时，进样量应不大于定量环体积的50%，并要求每次进样体积准确、相同；
5.4.2.2. 如按完全装液法，用定量环定容进样时，进样量应不小于定量环体积的3倍（5~10倍准确性更佳）。
5.4.3. 按〈Single〉标签内右边的进样(Inject)按钮，等待窗口底部状态档内显示“Waiting”后，方可进样。
5.4.4. 将进样阀手柄转动至Load位置，将注射器针完全插入进样阀入口中，平稳地注入试样溶液，除另有规定外，让注射器留在进样阀上，将进样阀手柄快速转动至Inject位置，系统将自动运行，采集数据并记录图谱。
5.4.5. 让进样阀手柄保持在Inject位置，到下次进样前1~2min切换回Load位置，将注射器从进样阀中拔出。
5.4.6. 先用水再用试样溶液清洗注射器后，按以上程序继续进样，直至完成。
5.5. 数据处理（外标法）和打印
5.5.1. 右击系统主界面下的『Browse Project』图标，选择相应的项目，按「OK」进入Project窗口，选〈Channels〉标签。
5.5.2. 建立处理方法　选择一个待积分的标准，右击后选“Review”进入Review窗口。按「Processing Method Wizard」图标（左边第一个）进入New Processing Method向导窗口，按「OK」。
5.5.2.1. 划入一个感兴趣的最窄的峰，按「Next>」；
5.5.2.2. 划入一段包含噪声的基线，按「Next>」；
5.5.2.3. 划入一段要积分的区间，按「Next>」；
5.5.2.4. 根据情况选择最小峰面积和最小峰高，按「Next>」、「Next>」；
5.5.2.5. 在Name档内输入各组分峰的名称，按「Next>」、「Next>」；
5.5.2.6. 在Method Name档内填写方法名称，按「Finish」。退出Review窗口。
5.5.3. 修改标准　选中所有标准，右击后选“Alter Sample”进入Alter Sample窗口。
5.5.3.1. 在Sample Type档内将Unknown改成Standard；
5.5.3.2. 按「Amount」图标（左上第六个）进入Component Editor窗口；
5.5.3.3. 按「Copy from Process Method」图标（左上第五个），选择刚建立的处理方法，按「Open」，在Value和Units档内分别输入标准所含各组分的数值和单位，完成后按「OK」回到Alter Sample窗口；
5.5.3.4. 按「Save」图标存盘，退出Alter Sample窗口。
5.5.4. 积分　先选中所有标准，再选中所有未知样品，右击后选“Process”进入Background Processing & Reporting窗口，选Use specified processing methods，在右边档内选择刚建立的处理方法，按「OK」。
5.5.5. 打印　在Project窗口下选〈Results〉标签。
5.5.5.1. 选中要打印的标准/样品，右击后选“Preview”进入Open Report Method窗口，选合适的打印方法，按「OK」进入Report Publisher (Preview)窗口，预览打印的结果。按打印(Print)图标（左上第二个）即可打印结果。
5.5.5.2. 按「Close」可进入Report Publisher窗口对报告方法进行修改，完成后按「Print」图标（右数第二个）即可打印结果。
5.5.6. 数据处理完成后，关闭所有窗口，在主界面下按「Logout」退出系统，关闭Millennium32软件，再依次关闭电脑主机、显示器、打印机。
5.6. 清洗系统和关机
5.6.1. 数据采集完毕后，关闭检测器，继续以工作流动相冲洗10min后，换水冲洗。
5.6.2. 清洗进样阀
5.6.2.1. 用启动注射器吸10ml超纯水；
5.6.2.2. 将注射针导入口冲洗头（Rheodyne部件号7125-054）连接到注射器出口上（不要针），并将它们一起接到进样口上；
5.6.2.3. 使进样阀保持在Inject位置，慢慢将水推入，水将通过注射针导入口、引导管、注射针导入管和注射针密封圈，由样品溢出管排出。
5.6.3. 清洗柱
5.6.3.1. C18柱先用超纯水以1ml/min冲洗40min以上，再用甲醇或乙腈冲洗20min。
5.6.3.2. Protein PAK60柱先用超纯水冲洗90min以上，再用甲醇或乙腈冲洗40min。
5.6.4. 用水冲洗柱后，分别用20ml超纯水冲洗柱塞杆外部和法兰盘上小孔。
5.6.5. 清洗完成后，先将流速降到0，再依次关闭泵、脱气机、UPS，断开电源。
5.6.6. 填写使用记录。