抗体的选择和保存指南

四、怎样保存已获得的抗体

抗体无论是保存还是运输都应尽可能地避免反复冻融，收到抗体后请根据实验的需要，对抗体进行分装，避免同一管抗体反复冻融（反复冻融会导致抗体空间结构变性，导致多聚体形成，从而降低抗体的结合能力）。抗体保存得当与否，直接决定了抗体的活性和使用效果，如果抗体保存得当，抗体活性大部分都可以维持数年。请谨记，无论何时请按照说明书推荐的保存条件正确处理和保存抗体。

1. 收到抗体后，请务必在4℃，12000rpm，离心3分钟，（无论是液体还是冻干粉状态），再打开管盖进行分装和保存（如果抗体体积小于50ul，请延长离心时间至5分钟，以保证全部抗体均离心下来）。抗体一般使用特制的储存管，只有在12000rpm离心3分钟，才能将附着在管壁或盖内的抗体全部离心下来（即使是在10000rpm离心也会离心不完全，导致出现抗体的量不足的现象）。

2. 对于ProSci大部分抗体，比较合适的保存方式是，分装后保存在-20℃或者-80℃。

（1）对绝大多数抗体来说，保存在-20℃就完全足够了，没有任何证据显示保存在-80℃会更好。

（2）分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害，同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。

（3）分装的量以一次实验用完为好，最少不能少于10ul每份。因为分装体积越小，抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。

（4）复融后的分装抗体如果一次用不完，将剩余母液保存在4℃，避免再冻起来。

（5）抗体工作液应该当天配制当天用完，4℃保存尽量不要超过1天。

（6）绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱中，将抗体保存在冰箱里层，避免温度变化造成反复冻融。

3. 大部分抗体收到后4℃短暂保存1~2周对抗体活性没有影响。

4. 大部分抗体的运输条件：一般的运输过程需要1~2周的时间，所以是在低温4℃的条件下来完成的。

4℃运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害（如果使用干冰运输，那么收到时抗体是冻起来的，为了分装就需要解冻，这就多了一次冻融的过程），所以运输过程中绝对避免干冰运输。

关于叠氮化钠（sodium azide）的使用：

为了防止微生物污染，叠氮化钠经常被加入到抗体中（终浓度0.02% (w/v)）。ProSci的绝大部分抗体已经含有了0.02％-0.05%的叠氮化钠，在说明书的储存缓冲液中有标明。

注：叠氮化钠的去除方式

可以通过凝胶电泳或过滤的方式去除，IgG的分子量是150kDa（IgM约600kDa）；叠氮化钠的分子量只有65Da，使用截留分子量为14kDa的滤膜即可将叠氮化钠从抗体中去除。