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色谱柱维修

液相色谱(LC)

  • 本人用来做替硝唑的一根C18柱,压力越来越高,新柱使用时压力为14,在2个月后变成了18,在此期间用0.1流速5%的甲醇和乙腈冲洗色谱柱过夜,效果不明显。几天前压力突然升高,对照峰分叉,之后用100%水冲洗没效果,甲醇乙腈分别进行梯度洗脱,0.1流速压力7.0,色谱峰分叉。
    之后分别用乙腈甲醇反冲,没有效果,0.1流速压力5.0.正冲0.1流速压力8.0
    考虑到正反冲没有效果,想超声筛板,可是打开柱头后发现筛板去不下来。
    请高人指点!!!!!!!!
    注:替硝唑流动相为0.05mol/l磷酸二氢钾:甲醇。流速1.0
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  • tangtang

    第1楼2011/12/11

    筛板堵塞,而且柱头塌陷的可能性较大。
    图看不太清,该筛板如果暴力拆卸可能会损坏。
    联系厂家售后协助解决。

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  • happy爱米粒

    第2楼2011/12/11

    楼主的样品一般都是什么基质的?如果样品中含有大量的脂质和蛋白除不干净会导致柱压升高,氢键作用力和分子间作用力双保留导致峰行拖尾
    建议按照下述流程冲洗一下试试:
    水——乙腈——异丙醇——乙腈——水 每种溶剂冲20倍柱体积
    如果实在是污染严重,也可以尝试:
    0.05M稀硫酸——二甲基桠枫——二甲基甲酰胺+水(1+1)
    每种溶剂冲20倍柱体积 流速<0.5ml/min
    记得冲洗色谱柱时,短路检测器
    死马当活马医吧,不行就换新柱吧

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  • 蓝人

    第3楼2011/12/12

    应助达人

    论坛里面有个 超声清洗柱子筛板的帖子
    你自己搜索下
    不用拆下筛板

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  • sunaiping

    第4楼2011/12/13

    我反冲柱子后压力还是没有下降,0.3的流速16的压力,可是峰没有拖尾了,。不过压力还是很大,怎么解决呢?

    木有才(xgy2005) 发表:楼主的样品一般都是什么基质的?如果样品中含有大量的脂质和蛋白除不干净会导致柱压升高,氢键作用力和分子间作用力双保留导致峰行拖尾
    建议按照下述流程冲洗一下试试:
    水——乙腈——异丙醇——乙腈——水 每种溶剂冲20倍柱体积
    如果实在是污染严重,也可以尝试:
    0.05M稀硫酸——二甲基桠枫——二甲基甲酰胺+水(1+1)
    每种溶剂冲20倍柱体积 流速<0.5ml/min
    记得冲洗色谱柱时,短路检测器
    死马当活马医吧,不行就换新柱吧

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  • sunaiping

    第5楼2011/12/13

    我的样品是替硝唑,本品为2-甲基-1-[2-(乙基磺酰基)乙基]-5-硝基-1H咪唑,属硝基咪唑类,在丙酮或氯仿中溶解,在水或乙醇中微溶。
    那么我在“水——乙腈——异丙醇——乙腈——水”冲洗流程中是不是可以将氯仿也加进去冲洗下,就放在异丙醇之前。求指教!!

    木有才(xgy2005) 发表:楼主的样品一般都是什么基质的?如果样品中含有大量的脂质和蛋白除不干净会导致柱压升高,氢键作用力和分子间作用力双保留导致峰行拖尾
    建议按照下述流程冲洗一下试试:
    水——乙腈——异丙醇——乙腈——水 每种溶剂冲20倍柱体积
    如果实在是污染严重,也可以尝试:
    0.05M稀硫酸——二甲基桠枫——二甲基甲酰胺+水(1+1)
    每种溶剂冲20倍柱体积 流速<0.5ml/min
    记得冲洗色谱柱时,短路检测器
    死马当活马医吧,不行就换新柱吧

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  • sunaiping

    第6楼2011/12/13

    现在柱子压力很高,0.3流速16的压力,可是在0.3的流速下出的峰不错有没有什么办法可以减低压力???????

    tangtang(tangtang) 发表:筛板堵塞,而且柱头塌陷的可能性较大。
    图看不太清,该筛板如果暴力拆卸可能会损坏。
    联系厂家售后协助解决。

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  • sunaiping

    第7楼2011/12/13

    谢谢,可是没有找到

    Blue-man(yuxiaofeng86) 发表:论坛里面有个 超声清洗柱子筛板的帖子
    你自己搜索下
    不用拆下筛板

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  • happy爱米粒

    第8楼2011/12/13

    当然可以啦,呵呵

    sunaiping(sunaiping) 发表:我的样品是替硝唑,本品为2-甲基-1-[2-(乙基磺酰基)乙基]-5-硝基-1H咪唑,属硝基咪唑类,在丙酮或氯仿中溶解,在水或乙醇中微溶。
    那么我在“水——乙腈——异丙醇——乙腈——水”冲洗流程中是不是可以将氯仿也加进去冲洗下,就放在异丙醇之前。求指教!!

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  • happy爱米粒

    第9楼2011/12/13

    呵呵,很不错的峰行啊,确定是柱子的问题吗?会不会是六通阀有问题?针座没堵吧?不知道压力大到什么程度,柱压的承受范围是多大。如果暂时可以接受就用小流速过夜慢慢冲洗吧

    sunaiping(sunaiping) 发表:我反冲柱子后压力还是没有下降,0.3的流速16的压力,可是峰没有拖尾了,。不过压力还是很大,怎么解决呢?

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  • sunaiping

    第10楼2011/12/13

    可以确定是柱子的问题,卸下柱子0.8流速0.6压力。现在0.3的流速16的压力。走的流动相是甲醇:水=25:75。

    木有才(xgy2005) 发表:呵呵,很不错的峰行啊,确定是柱子的问题吗?会不会是六通阀有问题?针座没堵吧?不知道压力大到什么程度,柱压的承受范围是多大。如果暂时可以接受就用小流速过夜慢慢冲洗吧

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