用实例来阐述如何应对测试中的干扰

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2011/12/19

私聊

气质联用（GCMS）

序言：岁末了，工作才相对轻松点，能有时间来这里和大家讨论交流，顺便赶上这趟末班车，希望能有所收获。
背景：近日在论坛上见到有版友发帖求助对测试中的干扰物进行定性。下面，我以我负责的项目为实例来阐述如何应对干扰，希望能给大家一个参考。
本人在公司GCMS这块主要负责有机锡这个项目，方法是根据ISO17353转过来的，前处理大致过程是这样的：用试剂超声萃取（加内标 DHT），转移到分液漏斗，加衍生化试剂（四乙基硼酸钠的THF试剂），用Hexane液液萃取，转移到氮吹管氮吹浓缩到1ml以下，用Hexane定容到1ml,过滤膜到样品小瓶，上GC-MS分析。本方法是用内标法定量，工作曲线5个Level,分别是0.02mg/l,0.05mg/l,0.1mg/l,0/5mg/l,1mg/l；MDL=0.02mg/kg.
我这个项目通常所说的干扰是指内标受到干扰或者目标组分被干扰（通常是指目标物组分保留时间落在一个大包峰里面或存在干扰离子）；在工作中遇到的干扰通常有这几种：
一，样品受前一针的干扰导致内标不出；这种情况的发生一般是前面走过脏样，污染了系统，导致接下来的几个样品内标响应很低，甚至不出峰，这个时候我们重读下受到干扰的几个样品即可（有时候还需要对仪器进行维护，比如换衬管等操作），这是最容易处理的情况。如图：16369-1ART的DHT响应有3570，而16369-1BRT受到16369-1ART的干扰，DHT的响应只有971；重读后16369-1BRT-R的内标DHT响应有3549.
16369-1ART：

16369-1BRT

16369-1BRT-R

二，由于样品本身比较脏，导致内标受到干扰，响应低，这种情况可以参照一，先重读一次，如果效果响应还是很低的话，则可以在 MDL允许的情况下减少称样量重做，一般情况下做如是处理就可以解决问题了，展图谱如下（找到相关谱图了，所以今天把图给附上）：21146-1是称量1g，谱图的DBT峰有干扰；而把称量减少到0.25g后的谱图21146-1RT-B的DBT峰很干净漂亮。
21146-1:DBT峰有点分叉。

21146-1RT-B：称量0.25g，DBT的峰很明显，也很漂亮。

三，目标组分包含在大包峰里；这种情况在我实验经常见到，鞋底或者RUBBER样品通常会遇到这样的情况，这一年来被ADIDAS送来的一些鞋底和RUBBER样折腾的不成人形了；在此我列举个典型的RUBBER样图谱一起来和大家分享下：25260-1R是一个RUBBER样品走出来的图谱，DOT的出峰时间在大包里面，干扰严重，我们无法对它进行判断，这时，请不要惊慌（对于我来说已经司空见惯了），用它和BS（Blank spike 实验室的质控样，浓度为 0.1mg/l）做个1比1加标上机走之，然后compare 原样和加标后的谱图（擦亮您的眼睛，放大着看哦），25260-1-spike0.05就是1比1加标后的谱图，如下：

25260-1R：DOT在大包里，干扰严重；

25260-1R：DOT出峰处MC放大图

25260-1-spike0.05ppm：DOT冒出了头；

25260-1spike0.05ppm:DOT的MC放大图，375和373这对同位素离子出的很好。

比较之后发现加标之后DOT能出来，DOT可以出ND，这个方法屡试不爽，相信版友们也会碰到我这样的情况，看了我的帖子应该知道怎么应对这种情况了吧，很常见的case哦。

四，被测组分出现类似目标物的特征离子，这种情况下，一般先做个后加标，看加标后会不会出现分叉，如果分叉，则可以判定是干扰离子；如果加标不分叉的话，就要做进一步处理了，在此我列举自己在11月份遇到的case同大家分享，实验编号为：38633-1；该样品在第一次筛数处理的时候（常规升温程序），发现TBT有峰，而且特征离子都有，保留时间也没有偏移，但是用291做定量离子积分的结果和用263做定量离子定量的结果有不小差异，于是就拿样品和BS（实验室质控样，内含目标各组分0.1mg/l）做了个后加标处理，加标的编号为38633-1spike0.05ppm，加标后发现TBT并未分叉，由于之前我们用不同的定量离子计算的结果有差异，且后加标不分叉，于是我们就编辑了一个长升温程序重读一遍原样和加标后的样品，结果发现后加标的TBT分叉了，所以我们下结论TBT为阴性；见谱图如下：

常规升温程序38633-1和38633-1spike0.05ppm
38633-1的TBT峰：

后加标的TBT

长升温程序工作曲线单点tin-0.1ppm-long,38633-1-long和38633-1spike0.05ppm-long

工作曲线tin-0.1ppm-long的TBT

长升温程序38633-1的TBT

长升温程序38633-1-spike0.05ppm-long的TBT，从图中看到明显的分叉，所以判TBT为阴性。

五，样品本身含有机锡；这样的case我今年遇到3次了，头两次是国庆前的事了，那2次都是硫醇甲基锡，做起来对柱子和整个系统的损害很大，后来我老大说不接此类的单，害我们走坏了一根色谱柱，手头上也没有相关图谱了，最近一例发生了11.30号，该样品描述是有机锡催化剂，编号是C13744-1，第一次做的时候内标DHT完全不出而且被一个大包覆盖着，从谱图来看是种有机锡化合物，所以我就把它稀释10倍重做的C13744-1ART,结果内标DHT依然不出峰，将其与BS（浓度为0.1mg/l的质控样）做1比1加标后发现内标有小小峰冒出，于是，第三次重做我们就做了几组比对样，第一组是稀释200倍，衍生化试剂加100ul，第二组是稀释200倍，衍生化试剂加300ul,第三组是稀释20倍，衍生化试剂加1ml,每组同时做一个0.1mg/l的过程加标，结果第二组内标DHT响应最高，加标各组分响应值也最高；由此得出结论，相同稀释的倍数，随着衍生化试剂的增加，各组分响应增大；绝对量相同的衍生化试剂，基体含量越少各组分响应越大。图谱如下：

C13744-1：DHT不出峰，且被大包覆盖，从质谱图来分析，大包也是某种有机锡物质。

C13744-1ART：内标DHT不出峰；

C13744-1ART-spike0.05ppm:DHT冒出小小峰，同时加标组分也出峰（以DBT为示例）；

C13744-1ART-spike0.05ppm DBT出峰：

C13744-1CRT，稀释200倍，加100ul衍生化试剂，C13744-1DRT相当于C的过程加标，加标浓度0.1mg/l，内标DHT响应在1200左右，谱图如下：

C13744-1CRT，内标DHT响应1169.

C13744-1DRT,内标DHT响应1230，过程加标DBT响应为655（举DBT为例）
DHT

DBT

C13744-1ERT，稀释200倍，加300ul衍生化试剂，C13744-1FRT相当于E的过程加标，加标浓度0.1mg/l，内标DHT响应在2400左右，谱图如下:

C13744-1ERT, 内标DHT响应2509

C13744-1FRT,内标DHT响应2243，过程加标DBT响应1040

DHT

DBT

C13744-1GRT，稀释20倍，加1000ul衍生化试剂，C13744-1HRT相当于G的过程加标，加标浓度0.1mg/l，内标DHT勉强出峰，谱图如下：

C13744-1GRT，内标DHT能出峰，但是峰形不好，而且是手动积分的；

C13744-1HRT，内标DHT能出峰，过程加标也能出峰，内标DHT峰形不好，手动积分，DBT响应有944；

DHT

DBT

结束语：至此，本届原创大赛我的文章历时一个礼拜终于全部完成；虽然只是以我在工作中的项目为例进行说明，但是无论哪个项目，或多或少会遇到类似的问题，希望我的这篇文章能给大家在实际工作中来带帮助，无论内标法还是外标法，都可以用类似我这样的判断手法去排除干扰，谢谢各位版友的关注。

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damoguyan

第1楼2011/12/20

好文，收藏了，我们也是岛津的
楼主能具体说说THF配四乙基硼酸钠的具体过程吗？要注意什么？你有没有充氮气保存衍生试剂？

我购买的是1g装的NABEt4,我想不称量（最多用减量法称下），直接倒到5ml容量瓶用THF定容，然后再转移到10ml棕色容量瓶充氮气保存，这样行不？
另外下次买AR,GR的NABEt4，看有没有的卖。